蛋白纯化一步就搞定的黑科技

耗时长，产量低，

大家其实都一样

蛋白从克隆表达到纯化脱盐浓缩，一路经过千山万水，宝贵的活性蛋白产量是很多人的“命根子”。然鹅，努力的我们还是苦恼的时候多，欣喜的时候太少太少～～

纯化黑科技，是时候放大招了

有没有什么好方法能让操作步骤少一点、再少一点，而同时蛋白的活性及产量损失也少一点、再少一点？？

让我们看看那些蛋白操作高手的秘密武器吧

——Amicon^® Pro

由传统方法升级到革命性的Amicon^® Pro纯化超滤系统，纯化、浓缩、换液从此不同。

真的能这样操作？？

让我们一起来欣赏一下Amicon^® Pro带来的蛋白纯化浓缩的流畅操作。

操作1

亲和纯化——多样本操作，更快更好

6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间）

1. 在Amicon^® Pro上样池中加入200µL亲和纯化树脂（根据融合标签选择，50%悬浊液）和1.5mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1min。

2. 加入0.5mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1h，其间可温和搅动促进结合。

3. 1,000×g离心1min 以去除未结合杂质。

4. 加入1.5mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1min。

5. 上样池下端接上Amicon^® Ultra 0.5mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。

6. 加入1mL洗脱缓冲液与树脂混匀。孵育5min。

7. 4,000×g离心15min。

8. 加上蛋白样品Z终需要的缓冲液1.5mL。4,000×g离心15min，置换缓冲液的同时进行浓缩。

9. 倒转Amicon^® Ultra 0.5mL超滤管，1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。

操作2

脱盐/缓冲液置换并浓缩——

20倍体积温和换液，效率大大提升

5次低速离心，总耗时~35分钟

1. 在上样池中加入0.5mL TBS-T预湿Amicon^® Pro。1,000×g离心1min。

2. 优化选做：加入1.5mL用于置换的缓冲液，1,000×g离心1min。

3. 上样池下端接上Amicon^® Ultra 0.5mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。

4. 加入1.5mL样品，4,000×g离心15min进行浓缩。

5. 加入1.5mL需要置换的缓冲液，4,000×g离心15min，换液的同时进行浓缩。

6. 倒转Amicon^® Ultra 0.5mL超滤管，1,000×g离心回收处理好的蛋白。

操作3 

抗体标记——

操作步骤少、时间节省而抗体得率高

5次低速离心，总耗时~50分钟

1. 在上样池中加入0.5mL TBS-T预湿Amicon^® Pro。1,000×g离心1min。

2. 加入抗体样品

• 对于比较稀释的样品（< 1mg/mL）

- 上样池下端接上Amicon^® Ultra 0.5mL超滤管（建议使用50kDa）。

- 加上至多1mL抗体样品， 4,000×g离心15min。

• 对于浓度较高的的样品（ 1mg/mL）

- 在Amicon^® Ultra 0.5mL超滤管（建议使用50kDa）中加入至多100µL样品。

- 将装有样品的Amicon^® Ultra 0.5mL超滤管接在Amicon^® Pro上样池的下端。

3. Amicon^® Pro上样池内加入预先准备好的1.5mL含有染料的反应混合液。

4. 4,000×g离心15min。

5. 优化选做：将样品在室温下多孵育30 min。

6. 上样池中加入1.5mL PBS± NaN3。

7. 4,000×g离心15min换液同时浓缩。

8. 倒转Amicon^® Ultra 0.5mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。

更多关于Amicon^® Pro的灵活应用正在各个实验室里被大家创造出来～～

欢迎告诉我们Amicon^® Pro是如何帮助您提高蛋白操作效率的……

已经心动？

Amicon^® Pro 24个/盒

（不含超滤管）

目录号ACS500024

可自行搭配Amicon^® Ultra-0.5mL超滤管

· 3Kda 目录号UFC500396 

· 10Kda 目录号UFC501096 30Kda 目

· 录号UFC503096 

· 50Kda 目录号UFC505096 

· 100Kda 目录号UFC510096

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标准超滤管

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70mL超滤管

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平膜超滤管

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纯化超滤管

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搅拌式超滤杯

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透析管

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高通量超滤膜板

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临床样品超滤管

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