LISA检测试剂盒实验牛支原体效果

为比较3种抗牛支原体（M.bovis）血清抗体的ELISA检测试剂盒检测效果,ELISA检测试剂盒本实验应用3种检测M.bovis血清抗体ELISA诊断试剂盒对38份阳性样品（天然感染19份,人工感染18份）和37份阴性样品进行检测。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值比拟较，从而判断标本中牛支原体的存在与否。此外,3种试剂盒对牛传染性肋膜肺炎国际尺度血清（PS2）的检测结果显示HVRI试剂盒和Kit 1均为为阴性,Kit 2为阳性。因此,HVRI试剂盒与Kit 1更适于M.bovis检测和开展流行病学调查。用纯化的牛支原体抗体包被微孔板，制成固相抗体，可与样品中支原体相结合，经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后再与HRP标记的支原体抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经由彻底洗涤后加底物TMB显色。

牛支原体酶联免疫分析试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法（ELISA）测定标本中牛支原体。一致性检修结果显示:HVRI试剂盒与Kit 1的一致性较高;Kit 2与HVRI试剂盒、Kit 2与Kit 1有中度的一致性。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成的黄色。ELISA试剂盒结果表明:本实验室制备的HVRI试剂盒与商品化试剂盒Kit 1的检测结果和综合检测结果符合率分别达到92%和96%;而商品化试剂盒Kit 2的检测结果与综合检测结果符合率仅为74.67%。