做过核酸电泳的小伙伴们,想必都对溴化乙锭(Ethidium Bromide,EB)非常熟悉。由于EB是一种强诱变剂,可致癌或致畸,因此需要做好层层保护,避免直接接触,但还是总怕出现意外。此外,使用 EB 染色后需要使用紫外光照射,紫外光照射又可能损伤 DNA 样本,从而影响下游实验。
有没有一款可替代 EB 的安全核酸染料呢?
SYBR? Safe DNA 凝胶染料正是这样一款高灵敏度核酸染料,其使用独特配方,是溴化乙锭(EB)的安全替代物,使用蓝光进行激发。适用于对琼脂糖凝胶或丙烯酰胺凝胶中的 DNA 进行染色。
比溴化乙锭(EB)更安全
SYBR Safe DNA 凝胶染料经过专门配制且经过一系列的毒性试验评估,结果表明其比使用溴化乙锭导致突变的几率低,更为安全。
图 1. 与溴化乙锭相比,SYBR Safe DNA 凝胶染料在标准 Ames 测试中的致突变效应更低 (测试几种不同的鼠伤寒沙门氏菌菌株)。
有关 SYBR Safe 染料致突变性评估详细数据,可扫描以下二维码查看:
此外,SYBR Safe 染料推荐使用蓝光照射而非紫外光照射,可进一步减少暴露于有害紫外光下的危险,这对在切胶回收等实验中非常有用。
对环境更友好
基于全面的环境安全测试,根据美国联邦法规《资源保护及恢复法案(RCRA)》,SYBR Safe DNA 凝胶染料不属于有害废物,因此实验后无需特殊处理。SYBR Safe DNA 凝胶染料还符合《清洁水法》和国家污染物排放消除系统(NPDES)的规定。
提高克隆效率
已经证实,使用 SYBR Safe 染料进行核酸染色并通过 Invitrogen Safe Imager 蓝光透射仪观察 DNA 片段,与使用溴化乙锭(EB)染色并通过紫外光观察相比,克隆效率得到明显提升。
图 2. 增强的酶切克隆效率。lacZ 插入片段和 β-gal 载体在琼脂糖凝胶上进行电泳、并使用 SYBR Safe DNA 凝胶染料或 EB 染色。然后使用 Safe Imager 蓝光透射仪或紫外透射仪在规定的时间内对 DNA 片段进行可视化分析。从凝胶中切割回收插入片段和载体 DNA 条带,然后进行连接及转化感受态细胞,并在 ampicillin-X-gal 平板上接种。根据蓝白菌落总数(B)确定克隆效率。数据为三次实验的平均值。
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