翌圣ZymeEditor平台全方位定向改造Taq DNA聚合酶，赋能分子诊断产业升级

由于商业化分子酶主要采用工程菌株（如大肠杆菌等）进行重组表达，因此分子酶中会存在一定量的宿主基因组DNA残留。加上制备环境和人源等因素影响，分子酶制品中极易存在污染DNA。在病原体检测过程中，污染的DNA可能会淹没低丰度的靶标核酸或和靶标核酸一起被检出，导致结果的误判。Hieff UCF.ME^® Hotstart Sensitive Taq DNA Polymerase (Cat#14314ES)是翌圣精心打造的一款UCF.ME^®超低残留的Taq DNA聚合酶，该产品宿主（E. coli）基因组DNA残留水平极低，可广泛用于病原微生物检测等应用场景。

支持引物探针全预混的qPCR/RT-qPCR Mix的应用，可为终端使用客户省去繁琐的体系配制过程和降低多次加样带来的漏加、错加风险，为客户创造便捷、省时、高效率的良好体验。Hieff UCF.ME^® Hotstart Sensitive Taq DNA Polymerase (Cat#10726ES)是一款采用公司新一代双封闭抗体法修饰的热启动Taq酶，该Taq酶不仅支持引物探针全预混，而且与传统qPCR试剂相比具有更高的灵敏度、特异性以及高GC序列扩增能力，同时还支持快速程序，最快30min即可出结果。

图2：以质粒DNA为模板，使用10726ES配制成qPCR全预混液，在37℃下放置14天测试加速稳定性。结果显示：Ct值和荧光值无显著变化，表明以10726ES配制的预混液性能稳定。

图3：以ASFV基因重组质粒为模板，使用10726ES配制成的qPCR全预混液分别使用常规扩增程序和快速扩增程序对浓度为5 copies/T的模板进行20次重复扩增。结果表明Yeasen 10726ES配制成的qPCR全预混液最低检测限可达5 copies/T，且可兼容常规扩增程序和快速扩增程序。

直接PCR的核心是选择一款高度耐受的聚合酶，可直接对样本中的核酸分子进行PCR扩增，省去提取核酸的过程，从时间、经济、结果准确性多方面提高检测效率。翌圣生物研发的Hieff Unicon^® Hotstart Direct Taq DNA Polymerase (Cat#10717ES)是一款优秀的耐受抑制热启动Taq酶，可用于开发针对不同样品如咽拭子、全血、粪便、痰液等PCR产品，助力快速检测。

图4：使用10717ES配制成qPCR mix，测试该qPCR mix及各品牌同类型试剂在不同血液杂质背景中的耐受能力表现，结果显示10717ES配制成的qPCR mix对于EDTA、柠檬酸钠、0.5%全血有更高的耐受性。

tNGS技术将超多重PCR与高通量测序技术相结合，可同时检测样本中几十至几百种常见病原微生物及其耐药基因，在提高灵敏度的同时，可降低测序数据量，实现成本及性能的双重优化。Hieff Unicon^® Hotstart J-Taq DNA polymerase (Cat#10723ES)是一款扩增产量高、持续合成能力强的热启动Taq酶，可用于超多重PCR扩增。

图5：使用Yeasen 10723ES配制成多重PCR预混液，用于片段长度100-250 bp的1000重病原panel的扩增。结果显示：扩增效率高、扩增均一性较好，病原检出和竞品相当。

甲基化与许多疾病有密切的联系，因此对甲基化程度的检测可以很好地对疾病进行诊断。DNA经重亚硫酸盐处理后，甲基化的胞嘧啶不变，未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶，利用这一特征进行引物探针设计，可搭建qPCR检测体系实现对甲基化的监测。Hieff UNICON^® HotStart High Tolerant Taq DNA Polymerase (Cat#14317ES)是一款适用于重亚硫酸盐处理模板的热启动Taq酶，可用于搭建PCR体系用于甲基化样本的检测。

图6：使用Yeasen 14317ES配制成PCR预混液，用于重亚硫酸氢盐处理过的模板的扩增。结果显示：14317ES扩增效果优于T*同类产品。

SNP是人类可遗传的变异中最常见的一种，占所有已知多态性的90%以上，已成为人们研究各类疾病相关基因、药物设计和测试以及生物学基础研究的强有力工具。Hieff UNICON^® HotStart Super Specific Taq DNA Polymerase (Cat#14318ES)是一款自主研制的抗体进行封闭的高特异热启动DNA聚合酶，适用于ARMS-PCR和Taqman-MGB探针法等高特异性PCR扩增场景。

高特异性：适用于SNP基因分型，效果与T*同类产品相当

图7：使用Yeasen 14318ES配制成Arms-PCR预混液，用于含0.05%突变模板和100%野生型模板扩增，结果显示：预混液能有效检出含0.05%突变模板，且对野生型模板无扩增。

卓越的冻干性能：50℃加速25天，冻干品加速前后Ct值和荧光值均无显著变化

图8：使用Yeasen 13705ES配制成RT-qPCR预混液，同时扩增10⁵、10⁴、10³copies/mL 的新冠假病毒模板，进行冻干球50℃加速25天稳定性测试。结果显示：冻干品加速前后Ct值和荧光值均无显著变化，冻干产品稳定性良好。