hyclone胎牛血清 北京

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HyClone血清

胎牛血清由未出生的牛的血制成；新生牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。显然，胎牛血清是品质Zgao的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分Z少。血清的主要成分:血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或YZ生长活性是达到生理平衡的。

胎牛血清生产过程在一个可控的条件下进行。SIP灭菌、无菌过滤和分装作为关键的灭菌过程证实是有效的。产品生产符合质量管理标准ISO9001。胎牛血清生产过程遵循IVDD78/79/EC。适用MRC5、HEPG-2、Hela、3T3、Sf9、CHO、HYBRIDOMA、原代细胞和神经原细胞等的培养。

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胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。

组份与比例不同：两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同

用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。　　

血清保存和使用须注意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时，应先将血清至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加，血清在解冻和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。

1、如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?

将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须注意的是，融解过程中必须规则地摇晃均匀。
长时间储存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此，推荐在-20℃以下储存血清，并避免反复冻融。
我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时，请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

2、血清中包含絮状沉淀，它们是什么，怎么处理?

沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性，不会影响产品性质。要除去沉淀，离心血清(400g，1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部，将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀，因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以，使用产品时要摇动并加热血清至37℃，沉淀会自然消失。

1、实验室如何选择适合的血清?

国内一致认为HYCLONE的血清是Z好的，但是根据我在北美的经历，国外一般认为GIBCO比HYCLONE好，所以并不是价格决定质量，但是总的来说这两种价格普遍偏贵，一般不是太娇气的细胞，国产的就够用了。此外，由于国内HYCLONE，GIBCO并没有生产线，我们只能从dai理商那里买，而dai理商又鱼龙混杂，所以买到假货的可能性也很大。所以，我一般会从直销员那里买血清，有的国外生物公司由于刚刚进入ZG，知名度不高，但是其实在国外已经做得很不错了，如Wisent等，他们在国内有办事处，我会从那里拿，血清的品质和HYCLONE不相上下，但价格相对优惠很多。
2、如何避免血清中产生沉淀?

按如下操作可避免沉淀的产生：
(1)解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。
(2)血清分装冻存时，须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
(4)勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏，从而影响血清的品质。
(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。
(6)若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

1、培养基中添加了血清和抗生素后，可长期保存吗?

一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时，您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
2、为什么要热灭HX清?

加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学研究，培养ES细胞、平滑肌细胞时，推荐使用热灭HX清。

3、有必要做热灭活吗?

实验显示，经过正确处理的热灭HX清，对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者误认为是微生物的分裂扩增。
若非必须，可以不需要做热处理这一步。不但节省时间，更确保血清的质量!
1、细胞培养中出现黑点是污染吗?如何处理?

一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成，首先，要肉眼观察培养基是否混浊，然后，在镜下观察培养细胞生长的状态，黑点是否游动。如果细胞被污染，微生物则会大量繁殖，培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。
如果在镜下观察细胞，生长状态良好，与黑点出现前相比，没有任何变化，那么，黑点的出现可能与以下几种情况有关：
(1)细胞生长过老，破碎的细胞残骸;
(2)血清质量不好，反复冻融的结果;
(3)配制培养基的pH值偏高，不宜细胞生长;
(4)配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
(5)培养原代细胞中出现小黑点，可能是原代组织中的杂质，多次传代可以消除。

2、细胞培养中如何防止黑点生成?

(1)尽可能地减少血清冻融次数。
(2)培养基无需37℃水浴。
(3)培养基保持Z佳PH值7.0-7.2。
(4)严格控制配制培养基的水质，容器定期刷洗。
(5)掌握细胞传代的Z佳时机，细胞切勿生长过老。

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小牛血清和胎牛血清有何区别与注意事项?

来源不同：胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calfserum,CS)采自出生10至14天的小牛。
组份与比例不同：两者所含的促细胞生长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与比例不同，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能生长，而有些细胞只需小牛血清即可，使用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。
血清保存和使用须注意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时，应先将血清至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中，如放在37℃解冻，颜色加深，粘稠度也会增加，血清在解冻和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，避免反复冻融。

胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三种之间的区别：

这三种血清的成份，总体没有什么明显差别，只是有一些成分与其生存环境有关，如上述有人说的抗体等很少。此外，因生长发育的需要，有些成分在小牛出生后会发生一些变化。不过还没有搞清楚它与其它的血清之间的差别。有一点可以肯定，胎牛血清中的部分功能蛋白与小牛血清中的含量有差别。

胎牛本身生活在一个洁净环境当中，其血清与外界隔绝，只要生产工艺科学规范，其质量肯定要新生牛和小牛bi要好。
血清是血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或YZ生长活性是达到生理平衡的。对血清的成分和作用的研究虽有很大进展，但仍存在一些问题。

胎牛血清是品质Zgao的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分Z少。

根据血红蛋白含量的不同，胎牛血清可表现出黄色或红色，我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl，实际上，血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响，这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度，良好的操作能降低血清的溶血。
国产血清的采血点很分散，大多是由屠户采血后马上离心收集，所以很少会有溶血，表现出明亮的蜡黄色，当然，国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。
进口胎牛血清或多或少总有点溶血，因为真正的胎牛血清凝血功能差，红细胞容易破裂。
总的来说，国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清，质量Z好的呈现出谈黄、微红色，如Gibco16000，差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然，热灭HX清或保存不当的血清，由于血红蛋白的破坏氧化，会呈现出暗红，甚至咖啡色。

很多血清客户，会发现进口血清有沉淀，从而怀疑血清的质量问题，这是没有根据的。
血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生，对血清质量没有任何影响，沉淀的产生原因很多，和厂家的加工生产方式密切相关。

二、主要技术指标
目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》，主要指标有以下几点：

1、内毒素
标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分，因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前，国产血清基本都能达到这一要求，很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高，如Gibco26140，只要求不高于50EU/ml，高出我国标准10倍，即使是16000，也要10EU/ml，血清质量也未见影响。可见，内毒素含量偏高不影响质量，除非含量极高，预示着已经污染。

2、总蛋白含量
胎牛血清一般范围是30-40mg/ml，数值偏高，说明采血的牛龄偏大，不是胎牛，数值偏低，表明血清可能掺水了。

3、血红蛋白
标准为不高于20mg/dl，颜色越红，数值越高，反之，数值越低。

4、pH
国产血清，大多高于7.5，进口胎牛血清，大多低于7.5，具体原因未知，可能和牛龄有关，这也能用来初步鉴别血清的来源。

5、微生物
包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高，细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能1**%控制，支原体经过0.1um过滤，大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的，主要是生产环境过程中带入，又无法过滤，很难彻底清除，但对血清质量影响不大。病原性病毒，特别是BVDV，在国产血清中几乎90%以上都存在，这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一，而进口胎牛血清中基本都控制的很好。

6、免疫球蛋白
国产血清的只是定性检测，结果也很不准确，进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况，国产血清，基本都是新生牛的，血清中容易产生IgM，IgG的含量也偏高，进口胎牛血清，不含IgM，IgG的含量也较低。

7、其它
不管是国产还是进口血清，都是不测抗生素的(无四环素胎牛血清除外)。国外，抗生素的使用很严格，用量也很少，每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的，因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低;国内，抗生素的滥用已成了普遍现象，血清中残留很高，对细胞培养极为不利，这是国产血清质量差的根本原因。

市场上的血清血源主要分为ZG、北美、南美和澳洲。

1、国产血清质量差，这是公认的，主要原因并不是生产厂家的责任，而是天然环境差和抗生素的大量使用。国内环境污染严重，同时饲养过程中抗生素极其滥用，有毒有害物质会大量残留在血清中，Z终不利于细胞的生长。

2、南美血清，来源很多，如Bioind的巴拿马、Gibco的乌拉圭、巴西等，这些血清由于采血的不可控性，质量参差不齐，当然，相对于国内血清来说好的多。另外，国内销售的南美血清大多颜色鲜红，如Bioind、Gibco、Hyclone等品牌，但阿根廷的血清例外，这可能和各国的采血、生产工艺有关。

3、北美血清，主要来自美国和加拿大，如Hyclone的SH30396、SH30070、SH30071、Gibco的16000-044、26140-079等。这类血清，等级越高的颜色越淡，表现为淡黄中带一点微红，SH30070和SH30396对比就很明显，特级胎牛血清基本就能进行干细胞培养。北美血清还有一个显著特点就是每瓶血清都能溯源，这对一些大型的疫苗厂、药厂尤为重要。

4、澳洲血清，来源主要是新西兰和澳大利亚，这是在北美血清禁运之后进入ZG市场的，一般不具有溯源功能，由于生产、运输等原因，价格相对来说比较贵。拿Gibco的10099和16000相比较，后者质量等级更高，颜色更淡，性价比更高。

1、Hyclone的特级胎牛血清
目前，性能Z好的血清，还是要说说Hyclone的特级胎牛血清，货号是SH30070.03，它是Hyclone的“招牌菜”。
Hyclone特级胎牛血清（DefinedFBS），货号SH30070，是世界上唯yi经过40纳米过滤的ding级胎牛血清，的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量≤10EU/ml，血红蛋白含量≤10mg/dl。
此血清可以广泛用于各种细胞培养，包含任何干细胞系的培养。
因为美国那边有疯牛病，无法进口。实际上，40nm的过滤，已经将全部的病毒、支原体处理掉，同时，是用于科研级别的，洁净程度非常高。不让进口，只是我们国家为了保护本国畜牧业的一个手段，针对牛肉方面，而胎牛血清是受到殃及而已。

2、Gibco的特级胎牛血清
稍次一点的是Gibco公司在美国原装生产的特级胎牛血清，这款血清，货号是16000-044是100nm过滤3次，内毒素和血红蛋白含量都可以与Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培养大部分的干细胞系。同样是美国来源，所以渠道特殊。

Hyclone的加拿大优等胎牛血清
性价比Zgao的是Hyclone加拿大优等胎牛血清（CharacterizendFBS）SH30396血清采自加拿大，由hyclone公司总部的员工采集加工，采集方法，加工过程，检定标准与美国原产优等胎牛血清完全一致，市场价格低于美国原产的。经过3次100nm过滤，内毒素含量≤25EU/ml，血红蛋白含量≤25mg/dl。

Hyclone的澳大利亚胎牛血清
大体与加拿大的优等血清是一样的，级别也非常相似，货号是SH30084，这个血清的血源是非疫区的，所以，各种级别都有，100ml、500ml市面上都能买到。

Gibco的澳大利亚胎牛血清
情况和Hyclone的澳大利亚胎牛血清差不多，市场价也是3200元/500ml左右。
这一级别的血清，也能用于干细胞培养，可是，不象特级胎牛血清那么。
因为，此胎牛血清属于澳大利亚生产的，不在疫区，可以正常报关进口，目前没有受到任何影响，所以，就目前而言，算是Z好的胎牛血清了，有不少客户都用此血清来培养干细胞，效果还是比较不错。

Hyclone的南美胎牛血清
目前，市场上用的Z多的Hyclone血清是南美胎牛血清(FBS)SV30087，此血清采自南美，在国内（兰州）过滤并测试检验，经三次100纳米过滤，根据ZG商标法的规定标贴中文标签，内毒素含量≤10EU/ml,血红蛋白含量≤20mg/d。
此血清广泛用于各种肿瘤细胞的培养，还没有资料记载能够用于干细胞，也听说有少数人用于干细胞培养的，不过，因为本身血红素比较高，所以，Z好不要用于干细胞。

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胎牛血清说明书

［品名］胎牛血清（FBS）

［性状］无溶血、无异物，浅黄色澄清液体。

［应用范围］适用于细胞株保藏、瘤细胞等培养。

［注意事项］

1.血清解冻：将血清从冰冻区中取出后（切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀），先置于2～8℃区域中使之融化，然后在室温下使之全融。使用前再预温到将使用的温度（如37℃），但必须注意的是，解冻过程中应轻轻地摇晃均匀。

血清在解冻过程中可能会出现少量絮状或片状析出物，主要是血清中脂蛋白的变性或是纤维蛋白（形成凝血的蛋白之一）析出，但这些析出物，并不影响血清本身的质量。若一次无法用完一瓶，建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

2.血清热灭活：一般以56℃、30分钟水浴来处理已预温至该温度的血清。

因为此加热步骤，可以使补体去活性，而补体所参与的反应有：溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。实验显示，经过正确处理的热灭HX清，对大多数的细胞而言是不需要的。经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进，或完全没有任何作用，甚至通常因为高温处理影响了血清的质量，而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清，沉淀物的形成会显著的增多，这些沉淀物在倒置显微镜下观察，像是“小黑点”，常常会让研究者误以为是血清遭受污染，而把血清放在37℃环境中，又会使此沉淀物更增多，使研究者认为是微生物的分裂扩增。

因此我们建议若非必须，可以不需要做热灭活这一步，以确保血清的质量。

3.避免析出物和澄明度降低：建议在使用血清的时候，注意正确的血清解冻步骤，并尽量避免热灭HX清及长时间的将血清置于非冻结状态。

［贮存条件］-2０～-10℃。

［有效期］五年。

特级新生牛血清说明书

［品名］特级新生牛血清(SuperfineNBS)

［性状］无溶血、无异物，浅黄色澄清液体。

［应用范围］适用于原、传代细胞培养,单体研制。

优级新生牛血清说明书

［品名］优级新生牛血清(CharacterizedNBS)

［性状］无溶血、无异物，浅黄色澄清液体。

［应用范围］适用于原、传代细胞培养,科研、兽用疫苗生产。

新生牛血清说明书

［品名］新生牛血清(NBS)

［性状］无溶血、无异物，浅黄色澄清液体。

［应用范围］适用于细胞培养和体外诊断试剂生产等。

马血清说明书

［品名］马血清(EquineSerum)

［性状］无溶血、无异物，浅黄色澄清液体。

［应用范围］适用科研、细胞培养和体外诊断试剂生产。

猪血清说明书

［品名］猪血清(PigSerum)

［性状］无溶血、无异物，浅黄色澄清液体。

［应用范围］适用科研、细胞培养和体外诊断试剂生产。

胎牛血清应取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。　　
显然，胎牛血清是品质Zgao的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分Z少。

用法：血清由冰冻状态在常温下完全融化成液体，摇均匀后放置10-30分钟待结块蛋白质沉底后即可使用。

注意事项：有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。血清在室温或4℃冰箱内放置过久会影响促细胞生长效果。

长期现货供应胎牛血清、特级新生牛血清、优级新生牛血清、标准新生牛血清、马血清、绵羊血清、兔血清、鸡血清、猪血清、大牛血清、小鼠血清、豚鼠血清等各种血清，采取无菌采制、辐照灭菌和无菌过滤。

血清使用注意事项

1.血清解冻:

Z好采用逐步解冻法(-20℃→2-8℃→室温或37℃),解冻过程中必须随时规则摇匀.使温度及血清成分均一,减少沉淀的发生,使血清质量不会受到影响.

2.血清絮凝物:

血清解冻后会有少量片状或絮状物析出,原因有多种,主要是由于血清不稳定、蛋白变性、纤维蛋白析出造成沉淀物.实验显示，这并不会影响血清本身的质量.

3.热灭活：

除注明外均未经灭活.如需灭活,请严格操作,一般以56℃30分处理已解冻的血清.

4.运输：

一般用保温箱包装快速运输.实验证明,常温状态下短期融化(一般不超过7天)并不影响其使用效果.

5.血清贮存：

Z好密封避光保存在-20℃至-15℃条件下.切勿在0℃至4℃状态下长时间保存,若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻.

6.有效期

自检定合格之日起有效期为5年.

关键控制点

1.供体来源的可靠性

源自无污染、无疫病牧区,确保采自健康个体,并对供体来源做可追溯记录,血液采制完全由公司专业员工控制采集.

2.科学的粗制血清采集分离

公司所有粗制血清采制基地均按公司统一模式管理设置,在净化封闭系统内无菌采血,快速离心分离,冷藏收集血清.

3.严格的原料质量分级

只有经过检验、分级符合指标的血清才能放行进入下一道工序生产.

4.大批量充分混合技术

对同级别粗制血清经过充分混合处理,消除了区域和个体差的差异,尤其是单批生产能力达到100万毫升,再加上先进的生产工艺,设备和材料,大大减少了批内和批间差异,有效保证了产品的质量稳定性和均一性.

5.按现行国内达标检查标准控制全程每道生产工序

采用国内先进的空气净化系统,所有血清生产敞口工作点都严格控制在洁净区内、血清流通环节完全在封闭状态下,以确保血清的原始天然状态.

6.先进的工艺、设备和材料

使用进口的多级CJ、除支原体过滤器材,过滤孔径达到0.1μm.

7.完全自主、严格的质量检验

配备了齐全的先进仪器及质检材料，相关人员均需培训合格后上岗.确保每批血清产品质量完全符合相应等级的质量标准.

仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

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