二氧化碳培养箱加湿操作及水盘污染控制

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【导读】细胞培养所需的条件：37度的温度；5%二氧化碳浓度；环境湿度大于95%；温度可以通过PID精确控制；二氧化碳浓度可以通过红外传感器进行精确控制，如何来控制内部湿度？二氧化碳培养箱内...

细胞培养所需的条件：37度的温度；5%二氧化碳浓度；环境湿度大于95%；温度可以通过PID精确控制；二氧化碳浓度可以通过红外传感器进行精确控制，如何来控制内部湿度？

二氧化碳培养箱内通常采用两种方式控制箱体内湿度。一是采用被动控湿法，即通常的二氧化碳培养箱内均放置一个3L的水盘，内盛3L无菌纯水，37度的温度，水自然蒸发，使箱体内湿度达到95%。二是一些高级的二氧化碳培养箱，采用主动加湿系统(蒸汽发生器，加热水盘，喷雾器等)，可以控制箱体内的湿度，如低温培养时就需要主动加湿的方法。

水盘污染控制问题

这种高湿度条件下，放置在箱体内部的水盘中的纯净水，很容易造成微生物的滋生，产生污染，导致细胞培养完全失败。提醒采取主动加湿的情况下是不会存在水盘污染问题的。

目前，控制水盘内污染的方法有如下几种：

1、定期(至少每两周一次)，更换水盘内的无菌蒸馏水或无菌去离子水。

2、在水盘内添加适量硫酸铜，配制方法：20g无水硫酸铜＋5ml浓硫酸＋1L灭菌纯水。

3、夏季气温高时，水盘里加0.02％的叠氮钠可以有效的预防真菌污染。

4、水盘内添加适量抗生素。

5、定期为培养箱(含水盘)进行一次高温灭菌。

6、使用专用的水盘污染控制试剂，如市面上有些CO2培养箱厂家提供水盘污染控制专用的银离子消毒盒，说明书上描述能有效杀灭600中微生物，能持续使用6个月，但此类专用污染控制试剂较常规方法，存在价格较昂贵缺点。

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2004-11-27 09:41:32

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