elisa间接法原理及实验步骤

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【导读】ELISA实验中文酶联免疫吸附试验。可用于测定抗原，也可用于测定抗体。间接法是多种实验方法中最常用方法。elisa间接法原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为...

ELISA实验中文酶联免疫吸附试验。可用于测定抗原，也可用于测定抗体。间接法是多种实验方法中Z常用方法。elisa间接法原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。

elisa间接法操作步骤如下：

（1）将特异性抗原与固相载体连接，形成固相抗原：洗涤除去未结合的抗原及杂质。

（2）加稀释的受检血清：其中的特异抗体与抗原结合，形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后，固相载体上只留下特异性抗体。其他免疫球蛋白及血清中的杂质由于不能与固相抗原结合，在洗涤过程中被洗去。

（3）加酶标抗抗体：与固相复合物中的抗体结合，从而使该抗体间接记上酶。洗涤后，固相载体上的酶量就代表特异性抗体的量。例如欲测人对某种疾病的抗体，可用酶标羊抗人IgG抗体。

（4）加底物显色：颜色深度代表标本中受检抗体的量。

elisa间接法法只要更换不同的固相抗原，可以用一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体。

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2004-08-30 09:23:16

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