ELISA法检测干扰素的说明书

干扰素（IFN）是一类具有广谱抗病毒活性的蛋白质，仅在同种细胞上发挥作用。根据其来源、理化及生物学性质的不同，可分为IFN-α、IFN-β、IFN-γ3种干扰素。其中，IFN-α主要由白细胞产生，IFN-β由成纤维细胞产生，IFN-γ主要由T细胞在免疫应答中受到抗原或丝裂原活化后分泌产生。3种干扰素中，IFN-α、IFN-β抗病毒作用较强，IFN-丁免疫调节作用较强。目前已可用基因重组技术制备干扰素投入临床使用。

干扰素不能直接灭活病毒，其抗病毒作用是由于它能激活细胞内抗病毒蛋白基因，制造抗病毒蛋白，YZ病毒在体内复制。干扰素不仅可YZ已感染细胞内病毒的复制，而且还可使未感染细胞处于抗病毒状态，对中断病毒的细胞间传播有一定作用；但对病毒整合基因可能仅有暂时YZ其mRNA的转录作用，不能清除病毒基因。干扰素的免疫调节作用表现为它是重要的巨噬细胞活化因子（macro-phageactivatingfactor，MAF），活化的巨噬细胞能杀死病原微生物或杀伤肿瘤细胞。干扰素能增强各种细胞表达MAF分子从而有利于递呈抗原或利于T细胞对靶细胞的识别和杀伤；还能促进T、B细胞的分化，活化NK细胞和中性粒细胞，从而有助于加强免疫应答。由于干扰素不是一种淋巴细胞的生长因子，故常YZ淋巴细胞（特别是B细胞）的增殖。
[检测方法]ELISA法
[方法学原理]抗人IFN抗体包被在微孔反应板上，待测标本和标准品中的IFN会与抗人IFN抗体结合，游离的成分被洗去，同时加入生物素化的抗人IFN抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。生物素与亲和素特异结合，抗人IFN抗体与结合在单克隆抗体上的人IFN结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色剂，若反应孔中有IFN，HRP会使五色的显色剂呈现蓝色，加终止液变黄色。在波长450nm处测吸光度，IFN浓度与吸光度成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中的IFN浓度。
[仪器]酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。
[检测步骤]
1．在微孔反应板相应孔中分别加入待测样本、不同浓度标准品100ul，再加生物素化抗体工作液50ul。
2．振荡混匀，置20～25℃环境中温育120min。
3．将孔内液体吸干，用洗涤液充分洗涤5次，干燥。
4．除空白孔外，加入酶结合物工作液100u1。
5．振荡混匀，置20～25℃环境中温育30min。
6．将孔内液体吸干，用洗涤液充分洗涤5次，干燥。
7．每孔加入显色剂A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃环境中避光显色10min。
8．加入终止液50gl后，轻轻振荡混匀。用酶标仪（450nm波长）测定各孔吸光度，与标准曲线对照，求出IFN值。
[正常参考值]各实验室可根据检测方法的不同确立正常参考值。
[注意事项]
1．试剂盒从冷藏环境中取出时应在室温环境中平衡30min后方可使用，来用完的微孔条用自封袋密封保存。
2．酶标板洗涤时各孔均需加满洗涤液，防止孔内有游离酶不能洗净。应设定30-60s的洗涤浸泡时间。
3。滴加试剂前应将滴瓶翻转数次，使液体混匀。滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。
4.所有样品和废弃物都应按传染源处理。终止液为2mol／L硫酸，使用时应注意安全
5.每批样本应同时做标准曲线。
6.检测剂工作液按说明书临用前配置。
7.若标本OD值在标准曲线测定范围以外，应适当稀释后重测。
[临床意义]IFN水平的改变主要见于自身免疫性疾病；在感染性疾病中，升高见于急性病毒感染，降低见于乙型肝炎病毒携带者、其他慢性病毒性肝炎及AIDS患者。

本公司长期经营Elisa试剂盒、实验耗材、抗体、细胞等生物化学试剂。价格实惠，质量有保证。提供免费检测服务：使用我公司试剂盒,只收取试剂盒的费用,我们将根据实验工作量和难易程度，双方协定实验周期，保质保量完成委托实验，并将实验结果和材料用特快专递免费寄送到您手中。

仪器网-专业分析仪器服务平台,实验室仪器设备交易网,仪器行业专业网络宣传媒体。

相关热词：

等离子清洗机,反应釜,旋转蒸发仪,高精度温湿度计,露点仪,高效液相色谱仪价格,霉菌试验箱,跌落试验台,离子色谱仪价格,噪声计,高压灭菌器,集菌仪,接地电阻测试仪型号,柱温箱,旋涡混合仪,电热套,场强仪万能材料试验机价格,洗瓶机,匀浆机,耐候试验箱,熔融指数仪,透射电子显微镜。