细胞增殖生长方面实验

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【导读】实验方法原理测定细胞绝对增长数值常用最简便的方法。一般过程为1.接种21孔/24孔板细胞（如用培养瓶时则21瓶）。2.分7组，每组3孔（或瓶），培养一周（7天），期间逐日检测一组，...

实验方法原理测定细胞增长数值常用Z简便的方法。

一般过程为

1.接种21孔/24孔板细胞（如用培养瓶时则21瓶）。

2.分7组，每组3孔（或瓶），培养一周（7天），期间逐日检测一组，计数。

3.把7天中的细胞数值绘成图，即为细胞生长曲线。实验材料

细胞

试剂、试剂盒

胰蛋白酶

仪器、耗材

吸管

实验步骤1.悬液制备

取待测生长状态良好细胞，增长至接近汇合时，向培养瓶内加1ml升0.25%胰蛋白酶液，37℃温箱中消化，至细胞接近脱离瓶壁前吸出消化液、加新的培养液、轻吹打制备成细悬液、计数；

2.接种

向每孔中接种等量细胞，置温箱中培养；把培养瓶中营养液倒入试管中并记录下毫升量；

3.计数检测

从次日起，即开始检测diyi组每个孔（或瓶）中的细胞总数，用计算盘或用细胞自动计数器计数，取3个孔的均值，如此至第7组结束；

4.绘图

用座标图纸绘成生长曲线。

收起注意事项

1.计数法简便易行，但不够精确，约有20%～30%的误差。为提高准确性，每孔也应计算2～3次，则总和每组计算总次数达6次～12次，均值可能更为精确。

2.细胞数量增加1倍的时间称倍增时间，亦可从细胞生长曲线中测知。

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2004-09-11 09:23:05

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