转基因水稻 BT63（TT51-1）质粒分子标准物质

Plasmid DNA Containing Genetically Modified BT63 (TT51-1) Rice DNA Fragments

       转基因水稻 BT63 (TT51-1)质粒分子标准物质的研制可用于转基因水稻、食品和饲料等的定量检 测、安全评价、实验室质量控制、方法评价与验证、技术仲裁等。

一、样品制备

       本标准物质是将转基因 BT63（TT51-1）水稻转化体特异性序列和内标准基因片段共同构建于 pEASY-T3 载体，得到 pNIM-003质粒分子，经提取，纯化和质量检测及均匀性初检合格后稀释至 8.9×105 拷贝/μL 进行分装。

二、溯源性及定值方法

       该标准物质采用测序法、数字 PCR 方法分别对转基因水稻 BT63（TT51-1）转化体特异性基因片 段和水稻内标准基因（RBE4）片断的拷贝数比值进行定值测量。测序法测量结果作为标准物质测序 比值标准值；数字 PCR 方法测量结果作为标准物质 PCR 比值标准值。本系列标准物质通过使用满足 计量学特性要求的制备方法、测量方法和计量器具，保证其量值溯源性。

三、特性量值及不确定度

       标准值不确定度评定考虑了定值方法、均匀性、稳定性引入的不确定度分量。

四、均匀性和稳定性考察

       按照 JJF1343-2012《标准物质定值的通用原则及统计学原理》，采用采实时荧光定量 PCR 方法对 该标准物质进行均匀性检验研究，最小取样量 5μL，结果表明均匀性良好。按照先密后疏的原则采 用实时荧光定量 PCR 方法对该标准物质进行稳定性考察研究，标准值无方向性变化并通过平均值一 致性检验，表明稳定性良好。

       本标准物质自定值日期起，有效期为 5 年，研制单位将继续跟踪监测该标准物质的稳定性，有 效期内如发现量值变化，将及时通知用户。

五、包装、储存及使用

1.包装与储存：本标准物质采用 2mL 立式拧口塑料离心管包装，500μL/瓶。建议-70?C 低温长期 保存。

2.使用注意事项：使用前应先从冰箱内取出，平衡至室温后再打开瓶盖使用。样品开封后，应 尽快恢复密封状态。

3.使用建议：使用本标准物质制作标准曲线时，按照表 1 进行梯度稀释，然后再采用荧光定量 PCR 进行检测，引物和探针序列[1, 2]详见表 2。

表 1 转基因水稻 BT63 质粒分子标准物质梯度稀释说明

 表 2 外源基因和内标准基因的引物及探针序列

声明

1．本标准物质仅供实验室研究与分析测试工作使用。因用户使用或储存不当所引起的投诉，不予承担责任。

2．收到后请立即核对品种、数量和包装，相关赔偿只限于标准物质本身，不涉及其他任何损失。

3．仅对加盖“ZG计量科学研究院标准物质专用章”的完整证书负责。请妥善保管此证书。

4．如需获得更多与应用有关的信息，请与技术咨询部门联系。