人急性淋巴母细胞性白血病细胞

培养方法

MOLT-4 人急性淋巴母细胞性白血病细胞

悬浮，淋巴母细胞样

编号： 338488

培养：37℃，5%CO₂ CM2-1 培养液

产品形式： 2mL 冻存管 × 2 支、或 离心管 15mL

安全等级： 一级，安全柜或超净台操作

收货须知：收货当天发现异常，请在 24 小时内及时联系客服，逾期视为收货良好；冻存管形式，收货后及时置于-80℃冰箱保存，若 长时间不使用，应过夜转移至液氮保藏；离心管 15mL，收货后先离心管原装置于培养箱静养 4h，然后再对细胞进行常规操作。复苏 时每管一次用完不得留存，复苏后传一代，即可正常使用。请严格按照本说明操作，否则造成细胞失活等情形，不予提供补发服务

培养条件：37℃，5%CO₂，CM2-1 培养液。CM2-1 培养液：90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640：1640 培养液，含谷氨酰胺。

复苏步骤：

①新制 100mm 平皿 1 个，含 12mL 上述培养液；

②冻存管从液氮或-80℃中取出，37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入安全柜复苏；

③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中，顺时针摇匀；

④放入（37℃，5%CO₂）培养箱中，过夜换液，10-15 天长满。

传代：将培养好的悬浮细胞轻轻吹打均匀，分配至 3~6 个新鲜培养液皿中，轻轻摇匀后放入培养箱培养；

冻存：将悬浮细胞转移至离心管中，(110g，3min)离心，离心完成后用 3mL 冻存液（90%FBS+10%DMSO）重悬细胞，吹打均匀，分为 3 支冻存管，用程序降温盒于-80℃冻存。

复苏质量记录：根据复苏要求，对以上细胞株进行复苏，记录结果如下：

项目	质量标准	复苏记录
复活性	360h 长满 80%	接种量 20%，过夜 18h 后观察悬浮至 30%，240 后密度达 80%
细胞形态	悬浮，淋巴母细胞样	CM2-1 培养液中，悬浮，淋巴母细胞样，圆形
附图
结论	复活性好，且细胞形态无异常，合格

质检员/日期： 张宜路 2020.06.03               审核员签字：丁保敏