资源编号:BNCC100407
英文名: THP-1
类型: 悬浮生长
形态: CM2-1培养液中,悬浮,淋巴母细胞样,圆形
分离基物: 外周血,单核细胞
提供形式: 复苏形式:15ml离心管1支;或者冻存形式:2ml冻存管两支,干冰费另计。
安全等级: 1
应用领域: THP-1细胞对乳汁珠和激活的红细胞有吞噬作用,无表面和胞质免疫球蛋白。THP-1细胞可以用佛波醇、TPA诱导单核细胞分化。
培养方法
| 培养基 | |
| 传代方法 | 将培养好的悬浮细胞轻轻吹打均匀,分配至3~6个新鲜培养液皿中,轻轻摇匀后放入培养箱培养; |
| 生长条件 | 37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养液,含谷氨酰胺。 |
| 生长特性 | 细胞有密度依赖特性,密度低时生长很慢,并且有聚集成团的现象,细胞对环境稳定性要求高,接种后尽量少移动,一般接种后3~4天观察即可,细胞冻存复苏存活率不高,冻存密度可以尽量大一点 |
| 存储条件 | 将悬浮细胞转移至离心管中,(110g,3min)离心,离心完成后用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)重悬细胞,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。 |
THP-1 人单核细胞
悬浮,淋巴母细胞样
编号: 100407
培养:37℃,5%CO2 CM2-1 培养液
产品形式: 2mL 冻存管 × 2 支、或 离心管 15mL
安全等级: 一级,安全柜或超净台操作
收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若 长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;离心管 15mL,收货后先离心管原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏 时每管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
培养条件:37℃,5%CO2,CM2-1 培养液。CM2-1 培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640 培养液,含谷氨酰胺。
复苏步骤:
①新制 100mm 平皿 1 个,含 12mL 上述培养液;
②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏;
③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,3-5 天长满。
传代:将培养好的悬浮细胞轻轻吹打均匀,分配至 3~6 个新鲜培养液皿中,轻轻摇匀后放入培养箱培养;
冻存:将悬浮细胞转移至离心管中,(110g,3min)离心,离心完成后用 3mL 冻存液(90%FBS+10%DMSO)重悬细胞,吹打均匀,分为 3 支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存。
复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:
| 项目 | 质量标准 | 复苏记录 |
| 复活性: | 108h 长满 80% | 接种量 20%,过夜 12h 后观察悬浮至 40%,96h 后密度达 80% |
| 细胞形态: | 悬浮,淋巴母细胞样 | CM2-1 培养液中,悬浮,淋巴母细胞样,圆形 |
| 附图: | ![]() | ![]() |
| 结论: | 复活性好,且细胞形态无异常,合格 |
质检员/日期: 丁保敏 2020.08.19 审核员签字:何立胜
关于此细胞株更多信息可在 BNCC 官网查询:www.bncc.org.cn.或发电子邮件至技术指导邮 箱咨询 tech@bncc.org.cn。
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