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小鼠中脑多巴胺能神经元细胞
- 品牌:北京北纳
- 货号:
- CAS编号:
- 产地:朝阳区
- 供应商报价: 面议
- 北京北纳创联生物技术研究院 更新时间:2022-07-22 10:46:09
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企业性质生产商
入驻年限第4年
营业执照已审核
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- 详细介绍
资源编号:BNCC340551
英文名: MN9D
提供形式: T25细胞培养瓶/冻存管
培养方法
培养基 90%EMEM(MEN+NEAA)+10%FBS 生长条件 95%空气+5%二氧化碳37摄氏度 生长特性 贴壁生长 存储条件 90%FBS+10%DMSO 液氮 MN9D 小鼠中脑多巴胺能神经元细胞
半贴壁半悬浮,神经元细胞
培养:37℃,5%CO2 1640 培养液
编号: 340551
产品形式: 2mL 冻存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶
安全等级: 一级,安全柜或超净台操作
收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若 长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;T25 形式,收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏时每 管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
培养条件:37℃,5%CO2,90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640 培养基,含谷氨酰胺。
复苏步骤:
①新制 100mm 平皿 1 个,含 12mL 上述培养液;
②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏;
③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;
④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,5-7 天长满。
传代/冻存:将培养液(含悬浮细胞)吸至离心管中,(110g,3min)离心,收集细胞;皿中细胞用 PBS 清洗两遍后,加入 2mL(/100mm 皿/T25 瓶)胰酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA),在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约 0.5mL,移至培养箱消化,约 1min 取出。
①传代:将以上皿细胞用 4mL 培养液终止消化,离心管细胞用 2mL 培养液重悬,共计 6mL 培 养液一并吸至皿里混匀,分1~2皿培养;
②冻存:用 3mL 冻存液(50%基础培养基+40%FBS+10%DMSO)终止消化,后吸出与离心管细胞 混匀,分为3支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存。
复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:
项目 质量标准 复苏记录 复活性 18h 贴壁,168h 长满 80% 过夜 18h 后观察贴壁,150h 密度达 80% 细胞形态 半贴壁半悬浮,神经元细胞 半贴壁半悬浮,神经元细胞,多角形,圆形 附图 结论 复活性好,且细胞形态无异常,合格 质检员/日期: 朱玥 2020.05.26 审核员签字:丁保敏