资源编号:BNCC100409
英文名: 293T
类型: 贴壁生长
形态: CM1-1培养液中,贴壁,上皮细胞样,中间凸起两端细长
分离基物: 胚肾;5型腺病毒及SV40转化;女性
提供形式: 复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级: 1
应用领域: 人胚肾细胞(293细胞株插入SV40 T-抗原的温度敏感基因后产生的高转染效率的衍生株称为293T),有用户反映用于腺病毒包装效率高。表达SV40大T抗原,可用于转染和作为包装细胞;用于瞬时转染时可高表达AP融合蛋白。293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系,293T细胞由293细胞派生,同时表达SV40大T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
培养方法
| 传代方法 | 将旧培养液吸除,PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约3min取出。传代用12mL CM1-1培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后可分3~6皿培养; |
| 生长条件 | 37℃,5%CO2,CM1-1培养液。CM1-1培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。 |
| 存储条件 | 冻存则用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存,过夜转移至液氮中保存。 |
293T 人胚肾细胞
贴壁,上皮细胞样
编号: 100409
培养:37℃,5%CO2 CM1-1培养液
产品形式: 2mL 冻存管 × 2支、或 T25 × 1瓶 ;
安全等级: 一级,安全柜或超净台操作
收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;T25 形式,收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏时每 管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
培养条件:37℃,5%CO2,CM1-1 培养液。CM1-1 培养液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM 高糖培养液,含谷氨酰胺,含丙酮酸钠。
复苏步骤:
①新制 100mm 平皿 1个,含 12mL 上述培养液;
②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入 安全柜复苏;
③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,2-4 天长满。
传代/冻存:将旧培养液吸除,PBS 清洗两遍后,加入 6mL(/100mm 皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约 0.5mL,移至培养箱消化,约 3min 取出。
①传代:12mL CM1-1 培养液终止消化,轻轻吹打均匀细胞,后 可分 3~6 皿培养;
②冻存: 6mL 冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,吹打均匀,分为 6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存。
复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:
| 项目 | 质量标准 | 复苏记录 |
| 复活性 | 12h贴壁,70h长满 80% | 过夜 18h后观察贴壁,66h密度达 70% |
| 细胞形态 | 贴壁,上皮细胞样 | CM1-1培养液中,贴壁,上皮细胞样,中间凸起两端细长 |
| 附图 | ![]() | ![]() |
| 结论 | 复活性好,且细胞形态无异常,合格 | |
质检员/日期: 杨晴 2018.6.8 审核员签字:曹勋
关于此细胞株更多信息可在 BNCC官网查询:www.bncc.org.cn.
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