资源编号:BNCC339284
英文名: Hi-five
提供形式: T25细胞培养瓶/冻存管
培养方法
| 培养基 | 90%TNM-FH (Sigma T1032)+10%FBS |
| 生长条件 | 95%空气+5%二氧化碳 37摄氏度 |
| 生长特性 | 半贴壁半悬浮生长 |
| 存储条件 | 50%培养基+40%FBS+10%DMSO 液氮 |
一、细胞名称:Hi-five
二、货 号:BNCC 339284
三、生长特性: □贴壁 □悬浮 ■半悬浮半贴壁
四、细胞生长条件:
| 培养基 | 90% TNM-FH (Sigma T1032) |
| 血清 | 10% FBS |
| 温度 | 28℃ |
| 空气条件 | 无 CO2 培养 该细胞生长具有密度依赖 ,低密度易死亡。 |
| 生长代数 | P4-5 |
| 冻存条件 | 培养基50%、血清40%、DMSO10% |
五、组成:
| 组成 | 规格 |
| 细胞一瓶 | T25 |
| 细胞培养与操作说明 | 1份 |
六、细胞接收后的操作流程与注意事项
1. 细胞收到后建议在培养箱稳定4小时左右再依据细胞密度,换液培养或传代。
2. 该细胞为半贴壁半悬浮细胞,若悬浮细胞较多且折光率良好,可离心收集,继续培养。
3. 若有少量细胞悬浮,也可不用收集,传代操作按常规贴壁细胞操作流程处理。
4. 若悬浮细胞较多,离心收集,原瓶中贴壁细胞按照常规规贴壁细胞操作流程进行消化、终止消化、吹打,并与之前收集的悬浮细胞混悬,分瓶培养。
七、细胞常规消化传代流程(请严格遵守无菌操作)
1. 吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2~3 ml 0.25% EDTA的胰酶消化(注意把握消化时间,通常控制在1~2min)。
2. 镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁运动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml 完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落、吹散。
3. 取出部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,于培养箱中培养。
4. 注意培养基PH值变化情况,定期换液或传代。
特别注意:(如使用公共实验室或初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)
1. 收到细胞后请尽快更换为含10% FBS的新鲜培养基,切勿使用原瓶中运输用培养基。
2. 如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时拍照并联系实验室。
3. 细胞任何售后问题,均需拍照存档并及时联系客服。
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