资源编号:BNCC339594
英文名: P815
类型: 半悬浮
形态: CM2-1培养液中,半贴壁半悬浮,上皮细胞样,短梭形,圆形
分离基物: 该细胞源自DBA/2小鼠的肥大细胞瘤;
提供形式: 复苏形式:T25培养瓶1瓶;或者冻存形式:2ml冻存管2支,干冰费另计。
安全等级: 1
培养方法
| 传代方法 | 将培养液(含悬浮细胞)吸至离心管中,(110g,3min)离心,收集细胞;皿中细胞用PBS清洗两遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约0.5mL,移至培养箱消化,约2min取出。①传代:将以上皿细胞用10mL CM2-1培养液终止消化,离心管细胞用2mLCM2-1培养液重悬,共计12mL培养液一并吸至皿里混匀,分3~6皿培养; |
| 生长条件 | 37℃,5%CO2,CM2-1培养液。CM2-1培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培养基,含谷氨酰胺。 |
| 存储条件 | 冻存:用6mL冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,后吸出与离心管细胞混匀,分为6支冻存管,用程序降温盒于-80℃冻存。 |
P815 小鼠肥大细胞瘤细胞
半贴壁半悬浮,上皮细胞样
编号: 339594
产品形式: 2mL 冻存管 × 2 支、或 T25 × 1 瓶 ;
安全等级: 一级,安全柜或超净台操作
培养:37℃,5%CO2 CM2-1 培养液
收货须知:收货当天发现异常,请在 24 小时内及时联系客服,逾期视为收货良好;冻存管形式,收货后及时置于-80℃冰箱保存,若 长时间不使用,应过夜转移至液氮保藏;T25 形式,收货后先培养瓶原装置于培养箱静养 4h,然后再对细胞进行常规操作。复苏时每 管一次用完不得留存,复苏后传一代,即可正常使用。请严格按照本说明操作,否则造成细胞失活等情形,不予提供补发服务。
培养条件:37℃,5%CO2,CM2-1 培养液。CM2-1 培养液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640 培养基,含谷氨酰胺。
复苏步骤:
①新制 100mm 平皿 1 个,含 12mL 上述培养液;
②冻存管从液氮或-80℃中取出,37℃水浴 1~2min,待完全溶解后尽快移入安全柜复苏;
③用无菌吸管吸取溶解液打入新制平皿中,顺时针摇匀;
④放入(37℃,5%CO2)培养箱中,过夜换液,2-4 天长满。
传代/冻存:将培养液(含悬浮细胞)吸至离心管中,(110g,3min)离心,收集细胞;皿中细胞用 PBS 清洗两遍后,加入 6mL(/100mm 皿)胰酶,在显微镜下观察,期间禁止摇晃培养皿,细胞刚有脱落时,则吸除大部分胰酶,留约 0.5mL,移至培养箱消化,约 2min 取 出。
①传代:将以上皿细胞用 10mL CM2-1 培养液终止消化,离心管细胞用 2mLCM2-1 培养液重悬,共计 12mL 培养液一并吸至皿里混 匀,分 3~6 皿培养;
②冻存:用 6mL 冻存液(90%FBS+10%DMSO)终止消化,后吸出与离心管细胞混匀,分为 6 支冻存管,用程序降温 盒于-80℃冻存。
复苏质量记录:根据复苏要求,对以上细胞株进行复苏,记录结果如下:
| 项目 | 质量标准 | 复苏记录 |
| 复活性 | 12h 贴壁,70h 长满 80% | 过夜 18h 后观察贴壁,66h 密度达 80% |
| 细胞形态 | 半贴壁半悬浮,上皮细胞样 | CM2-1 培养液中,半贴壁半悬浮,上皮细胞样,短梭形,圆形 |
| 附图 | ![]() | ![]() |
| 结论 | 复活性好,且细胞形态无异常,合格 | |
质检员/日期: 张鑫 2019.7.26 审核员签字:杨晴
报价:¥1200
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