己烯雌酚试剂盒

一、产品概要

己烯雌酚(Diethylstibestrol, DES)是一种人工合成的雌激素，在促进动物蛋白质的合成代谢、提高动物日增重和减少脂肪等方面效果明显，因此一直被作为一种动物生长促进剂用于畜禽以及水产品养殖中。国际癌症研究机构(IARC)研究发现,DES是一种致癌物质，能够在动物源性食品如肝脏、肌肉、蛋、奶中残留，并通过食物链危害人体健康。因此世界各国规定食用动物养殖中不得以任何途径和方式使用己烯雌酚养殖动物，动物性食品中不得检出己烯雌酚。

本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。

二、试验原理

本试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被己烯雌酚抗原，样品残留的己烯雌酚和微孔条上预包被的抗原共同竞争抗己烯雌酚抗体，加入酶标二抗后，经TMB底物显色，样品吸光度值与其残留物己烯雌酚呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中己烯雌酚的含量。

三、适用范围

可定性、定量检测动物组织、饲料、奶粉、牛奶等样品中己烯雌酚的残留量。

四、交叉反应率

己烯雌酚…………………………………………………100%

五、包装组成

酶标板、己烯雌酚标准品×6、己烯雌酚抗试剂、己烯雌酚酶标物、底物液A液、底物液B液、终止液、浓缩洗涤液(10×)、己烯雌酚浓缩样品稀释液(4×)、己烯雌酚酶标板处理液

六、样品前处理步骤

（一）动物组织前处理方法

称取匀浆后的组织样品，加入提取液（配液3），振荡混匀，离心；取上清液氮气吹干；加入样品稀释液（配液2），涡旋，点板分析；

稀释倍数：2

（二）饲料前处理方法

称取粉碎饲料样品，加入盐酸溶液（配液6），加入乙腈，振荡混匀，离心；取上清液，加入氢氧化钠溶液（配液7）调pH至中性，混匀，再加入二氯甲烷，混匀后离心；取下层液氮气吹干； 加入二氯甲烷，加入氢氧化钠溶液（配液8），混匀后离心；取上清液，加入磷酸溶液（配液5）调pH至中性并混匀；取50mL加入到450mL 样品稀释中（配液3）并充分混匀 ；分析。

稀释倍数：50

（三）奶粉前处理方法

称取奶粉样品，加入盐酸溶液（配液6），加入乙腈，振荡混匀，离心；取上清液，加入氢氧化钠溶液（配液7）调pH至中性并充分混匀，加入二氯甲烷，混匀后离心；取下层液氮气吹干；加入二氯甲烷，加入氢氧化钠溶液（配液8），混匀后离心；取上清液，加入磷酸溶液（配液5）调pH至中性并充分混匀；取100mL加入到300mL样品稀释液中（配液3）并充分混匀 ；分析。

稀释倍数：10

（四）牛奶前处理方法

取牛奶样品，加入乙腈，振荡混匀，离心；取上清，加入去离子水，加入，混匀离心；取下层液氮气吹干；加入二氯甲烷，加入氢氧化钠溶液（配液8），混匀后离心；取上清液，加入磷酸溶液（配液5）调pH至中性并充分混匀；取100mL加入到400mL 样品稀释液中（配液3）并充分混匀；分析。

稀释倍数：10

七、检测步骤

1、将所需试剂回温；

2、取微孔板；

3、洗涤工作液在使用前也需回温；

4、将样本和标准品对应微孔按序编号；

5、加标准品/样品；

6、洗板；

7、加酶标物；

8、显色；

9、测定；

八、 结果判定

粗略判定：用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围；

定量判定：定量分析

九、检测方法灵敏度、准确度、精密度

试剂盒灵敏度：0.1ppb

样品zuidi检测限：

动物组织…………………………………………………0.2ppb

饲料………………………………………………5ppb

奶粉……………………………………………………1ppb

牛奶……………………………………………………1ppb

回收率：

组织样品……………………………………………80±20%

饲料……………………………………………80±20%

牛奶…………………………………………………80±20%

奶粉……………………………………………80±20%

精密度：试剂盒的变异系数均小于10%

十、贮藏条件及保存期

贮藏条件：保存试剂盒于2~8℃；保存期： 该产品有效期为12个月。