口碑款-快速通用Hifair® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit

产品简介

 

Hifair^® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit是以 RNA 为模板进行多重定量 PCR 反应的试剂盒。在实验的过程中，逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行，简化了实验操作，降低了污染的风险。独特的 Buffer和酶的设计，可用于一步法 RT-qPCR 冻干反应体系的配制和产品设计。

本试剂盒利用耐热 Hifair^® V Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA，并利用 UNICON^® HotStart Taq DNA

Polymerase 进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的冻干 Buffer，Enzymes Mix 等，并添加了有效抑制非特异性 PCR 扩

增的因子和提升多重 qPCR 反应扩增效率的因子，能够在保证引物扩增效率的同时，进行多重荧光定量扩增反应。

本试剂盒中匹配了冻干保护剂，可以用于冻干。

 

产品信息

 

货号	11831ES60 / 11831ES80 / 11831ES92
规格	100 T / 1000 T / 10000 T

 

组分信息

 

组分编号	组分名称	11831ES60(100 T)	11831ES80(1000 T)	11831ES92(10000 T)
11831-A	4×Hifair® Lyo-Buffer	600 μL	6 mL	60 mL
11831-B	Hifair® Lyo-Enzyme Mix	100 μL	1 mL	10 mL
11831-C	冻干保护剂	800 μL	8 mL	80 mL

【注】1) 4×Hifair^® Lyo-Buffer 为 Lyo Multiplex One Step RT-qPCR kit 的简写。

2) Hifair^® Lyo-Enzyme Mix 主要包含有耐热 Hifair^® V Reverse Transcriptase 和 UNICON^® HotStart Taq DNA Polymerase。

 

运输条件

 

1. 保存方式：

Part 1： 11831-A【 4×Hifair^® Lyo-Buffer 】、11831-C【 冻干保护剂 】，-25~-15℃ 保存，有效期 1 年。

Part 2： 11831-B【 Hifair^® Lyo-Enzyme Mix 】，2~8℃ 保存，有效期 6 个月。

2. 运输方式：冰袋运输。

 

使用方法

 

1. 反应体系（以25uL体系为例）

组分	体积（μL）	终浓度
4×Hifair® Lyo-Buffer	6	1x
Hifair® Lyo-Enzyme Mix	1	-
冻干保护剂	8	-
Primer Mix(10μM)	1	0.1-1 uM
Probe Mix(10μM)	0.5	0.05-0.5 uM
模板RNA	5	-
DEPC H20	up to 25	-

2. 参考扩增程序

1）常规扩增程序

循环步骤	温度	时间	循环数
逆转录	50℃a	10 min	1
预变性	95℃	5 min	1
扩增反应	95℃	15 sec	45
	60℃b	30 secc

 

2）快速扩增程序

循环步骤	温度	时间	循环数
逆转录	50℃a	2 min	1
预变性	95℃	2 sec	1
扩增反应	95℃	1 sec	45
	60℃b	13 secc

【注】a. 逆转录：42℃或者50℃均可。

b. 扩增反应：扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。

c. 荧光信号采集：不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同，请根据最短时间限制进行设置。

3. 适用机型

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；

Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；

Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；

Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；

Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR

 

注意事项

 

1. 实验过程中请使用RNase free耗材。

2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。