琼脂培养基N（溴化十六烷基三甲铵琼脂）/用于绿脓假单胞菌的分离培养(EP标准)

用途:用于绿脓假单胞菌的分离培养。

用法

Suspend  45.3g/liter,  add   10ml  glycerol / liter,  heat  to   boiling  for  1  min  with  shaking,  autoclave  ( 15  min  at  121℃).Cool   to  50℃ and  pour into Petri   dishes.

称取本品45.3g,加热溶解于1000ml纯化水中, 加入甘油10ml,煮沸使混合均匀,分装三角瓶 ,121℃高压灭菌15分钟冷至50℃时,倾入无菌平皿备用。

注：培养基中含少量氯化镁，灭菌后可能出现微量沉淀。

原理：

1.营养成分：铜绿假单胞菌分解蛋白质能力较强，而发酵糖类能力较低，在培养基组分中明胶胰酶水解物和甘油为铜绿假单胞菌的生长提供碳、氮源、维生素和生长因子。

2.无机盐：氯化镁和硫酸钾可以促进绿脓菌素的产生，并维持渗透压。

3.选择性培养的原理：溴化十六烷基三甲铵(cetrimide)作为一种季铵盐阳离子表面活性剂，通过改变细菌细胞的通透性，使细菌发生自溶或引起菌体蛋白质变性沉淀，导致细菌死亡，有较强的抑菌作用。铜绿假单胞菌对溴化十六烷基三甲铵有一定的耐受性，因此，被用于铜绿假单胞菌的选择培养。

4.颜色：铜绿假单胞菌生长过程中会产生两种水溶性色素：黄色的荧光素和绿色的绿脓菌素，所以在溴化十六烷基三甲铵琼脂平板上菌落呈黄绿色。

铜绿假单胞菌在琼脂培养基N（EP）上的生长特征：

有绿色色素

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置30-35℃需氧培养18-24小时。

注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

十六烷三甲基溴化铵琼脂的使用原理及方法：