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《GB 5009.27-2016》食品中苯并(α)芘的测定应用
来源与性质:苯并芘,是含苯环的稠环芳烃,有强致癌性。食物高温烹调时容易产生苯并芘。根据苯环的稠合位置不同,苯并芘有多种异构体,常见的有两种是,一种是苯并[a]芘,CAS号为50-32-8;另一种苯并[e]芘,CAS号:192-97-2。苯并芘难溶于甲醇、乙醇,不溶于水,易溶于苯、甲苯、二甲苯、丙酮、乙醚、氯仿、二甲基亚砜等有机溶剂。最初由煤焦油中分离得到,从煤烟、焦油、沥青、香烟烟雾中都可以查出,有强烈的致癌作用,可以诱发肺癌。食物在熏制、烘烤和煎炸过程中,脂肪、胆固醇、蛋白质和碳水化合物等在高温条件下会发生热裂解反应,再经过环化和聚合反应就能够形成包括苯并芘在内的多环芳烃类物质,尤其是当食品在烟熏和烘烤过程中发生焦糊现象时,苯并芘的生成量将会比普通食物增加10~20倍。
法律与法规:《GB 2762-2022》对食品中的污染物制定了限量标准,其中苯并芘的限量标准是:熏烤肉为5μg /kg;植物油为 10μg/kg;粮食为5μg/kg;这和欧盟、世界卫生组织制定的标准基本一致。
《GB 5009.27-2016 食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定》试样经过有机溶剂提取,中性氧化铝或分子印迹小柱净化,浓缩至干,乙腈溶解,反相液相色谱分离,荧光检测器检测,根据色谱峰的保留时间定性,外标法定量。
曼哈格参考《GB 5009.27-2016 食品安全国家标准 食品中苯并(a)芘的测定》,重现了国标食用油中苯并[a]芘的检测方法,采用BePure-26905XA(乙腈中苯并[a]芘,101.0μg/mL)标准溶液,食用油中苯并(α)芘质控样BQC1020247875,BESEP苯并[a]芘分子印迹柱(78973-Q)净化样品,C18色谱柱分离,高效液相色谱仪荧光检测器检测,外标法定量。
一、标准物质
单标:乙腈中苯并(α)芘,101.0μg/mL
货号:BePure-26905XA
二、样品前处理
萃取柱类型及规格:苯并芘分子印迹柱,500mg/6mL
货号:78973-Q
质控样品:食用油中苯并(α)芘
货号:BQC1020247875
1、标准曲线配制:苯并(a)芘标准中间液(1.0 μg/mL)用乙腈稀释得到0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10.0 ng/mL、20.0 ng/mL的校准曲线溶液,临用现配。
2提取:
样品提取:称取 1 g(精确到0.001 g)试样,加入5 mL正己烷,旋涡混合0.5 min,40℃下超声提取 10 min,4000 r/min离心5 min,转移出上清液。再加入5 mL正己烷重复提取一次。
3、样品净化:
活化:苯并芘检测柱使用前用30mL正己烷活化。 |
上样:在苯并芘检测柱上加入待净化样品,收集流出液。 |
淋洗:/ |
洗脱:然后用 40 mL正己烷-二氯甲烷溶液(3:1)洗脱,收集流出液。 |
复溶:流出液 50 ℃减压蒸馏至近干,加 1 mL甲基叔丁基醚定容,过 0.45 μm滤膜,待上机测试。 |
三、仪器检测方法
a)色谱柱:C18,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm,或性能相当者;
b)流动相:乙腈+水=90+10;
c)流速:1.000mL/min;
d)荧光检测器:激发波长384nm,发射波长406nm;
e)柱温:35℃;
f)进样量:40μL。
四、检测结果与结论
检测项目 | 样品基质与编号 | 称样量m(g) | 仪器读数x(ng/mL) | 检测结果X(μg/kg) | 平均值 | |||
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