小鼠皮下结缔组织细胞|BNCC100035|冻存管；T25培养瓶

产品中文名称

小鼠皮下结缔组织细胞

产品英文名称

A9

参考用途

‖动物种别│小鼠‖性别│雄‖描述│A9细胞株由野生型细胞株L中分离得到。 对HAT选择培养基敏感，并缺失了腺苷转磷酸核糖基酶与次黄嘌呤转磷酸核糖基酶 对8-氮鸟嘌呤(0.003mg/ml)和6-硫代鸟嘌呤(0.1mM)有抗性。

形态特性

上皮细胞样，短梭形，多角形，边缘不规则，单层贴壁生长

培养基

DMEM-H完全培养基：90%DMEM-H+10%FBS

培养条件

37℃；5%CO2+95%空气；

培养方法

复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。
细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。

存储形式

液氮

提供形式

冻存管；T25培养瓶