人前列腺癌细胞|BNCC337703|冻存管；T25培养瓶

产品中文名称

人前列腺癌细胞

产品英文名称

LNCaP clone FGC

参考用途

是LNCaP的一种衍生细胞系，含有LNCaP的所有主要特征形状，包含雄性激素依赖性。

形态特性

上皮细胞样，不规则形，边缘不规则，堆积贴壁生长，背景干净，无空泡

培养基

LNCaP clone FGC专用培养基：88%RPMI-1640+10%FBS+1%谷氨酰胺+1%丙酮酸钠

培养条件

培养温度37℃；气体环境5%CO2+95%空气；

培养方法

复苏步骤：①冻存管从液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中，迅速没入37℃水浴锅，摇晃冻存管加速溶解，以1min内全部溶解为宜；②在超净台中将溶解好的细胞液加入到装有9mL完全培养基的离心管内，1000-1200rpm离心5min，弃去上清液，用1-2mL完全培养基重悬细胞。③将细胞悬液加入到含有5-6mL完全培养基的T25瓶中，放入培养箱培养。
细胞传代：①将旧培养液吸除，PBS清洗两遍后，加入1-2mL胰酶（0.25%Trypsin+0.02%EDTA）；②镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（可用吸管吸起些许胰酶轻轻吹打细胞层某处，肉眼可见细胞层脱落，即消化完成，否则继续消化），直接吸掉胰酶，加入5-6mL完全培养基，轻轻吹打细胞层，把细胞层吹落，吹散。③将细胞悬液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。；④注意培养基pH值变化和细胞密度，定期换液（每周2-3次），待细胞密度达到80%-90%时，重复传代操作或者冻存。

存储形式

液氮

提供形式

冻存管；T25培养瓶

备注

人前列腺癌细胞LNCaP克隆FGC是从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离，该患者经确诊为前列腺癌转移。 这株细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节子和酸性磷酸脂酶产物)有响应。 这株细胞并不形成一致的单层，而是形成集落，在传代时可以用滴管反复吹吸打碎。 它们仅仅轻轻地吸附在基底上，不形成汇合，很快使培养基变酸。 生长很慢。 传代后48小时内不应扰动。 当培养瓶封包后，多数细胞从培养瓶底分离，悬浮在培养基中。 收到后，在通常培养单层细胞的条件下培养24到48小时，以使细胞再贴壁。 此后可以换上新鲜培养液。 如果需要，培养瓶内容物可以收集，300g离心15分钟，以10毫升培养液重悬并培养到一个单独的培养瓶中。请使用Corning的Cellbind培养瓶培养。