细胞裂解液（中等强度）

B. 细胞样本：
悬浮细胞：
1.1 在2-8℃，2500rpm离心5min，收集细胞。
1.2 加入预冷的PBS，轻轻混匀，2-8℃，2500rpm离心5min，收集细胞。
1.3 加入0.5-1ml 裂解液，若后续需要进行免疫检测，建议不要添加NP-40，Triton X-100和高浓度DTT的组分，会抑制抗原抗体反应。需要时可以加入一些蛋白酶抑制剂，如1mM PMSF，置于冰上，裂解30min-1h。裂解过程中可用枪头吹打或间断摇动离心管，使蛋白充分裂解， 出现黏糊状是DNA，可以使用超声波破碎DNA（用超声波3-5mm探头，功率150-300W， 冰上超声处理样品，工作1-2 s，停止30秒， 3-5个循环）。
1.4 裂解或超声破碎完成，2-8℃，10000rpm离心10min，上清移入EP管中，立即用于检测，或分装于-80℃冻存备用。
贴壁细胞：
2.1 吸走上清液，加入预冷的PBS洗三次。
2.2 加入0.5-1ml裂解液及适量蛋白酶抑制剂（具体要求同悬浮细胞），用细胞刮轻轻刮下贴壁细胞。
2.3 细胞悬液转入离心管中，置于冰上，裂解30min-1h，或者配合超声波破碎（同悬浮细胞）。
2.4 裂解或超声破碎完成，2-8℃，10000rpm离心10min，上清移入EP管中，立即用于检测，或分装于-80℃冻存备用。；