DMS 53(人肺癌细胞)
DMS 53(人肺癌细胞)
HBMSC-SV40(人骨髓间充质干细胞永生化)
HEK-SV40-luc(人表皮角质形成细胞永生化（luc标记）)
HepG2-GFP(人肝癌细胞（GFP标记）)
| 一、NCI-H209 [H209]细胞基本属性 | |
| 细胞名称 | NCI-H209 [H209](人小细胞肺癌细胞) |
| 细胞别称 | H209；H-209；NCIH209 |
| 细胞货号 | SNL-387 |
| 来源 | 小细胞肺癌；骨髓转移；男性；55岁 |
| 细胞形态 | 圆形(成团或部分疏松贴壁) |
| 细胞类型 | |
| 生长特性 | 悬浮细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, forms transplantable tumors with typical SCLC histology in nude mice |
| 培养条件 | 1640+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | NCI-H209细胞是由A.F.Gazdar和同事于1979年从一名肺小细胞癌白人男性患者治疗前的骨髓中获得的。NCI-H209细胞C-myc DNA序列未扩增，未检测到DNA大体结构异常。NCI-H209细胞在悬浮液中生长为大的聚集体，只有聚集体是可以增殖的，但无法测量有效的存活百分比，培养基通常含有大量细胞碎片。NCI-H209细胞表达未磷酸化的异常形式RB1，显然是由于密码子706处的单点突变（Cys->Phe）。NCI-H209细胞是一种经典的SCLC细胞系，表达四种生化标志物（神经元特异性烯醇化酶、肌酸激酶脑同工酶、L-DOPA脱羧酶和蛙皮素样免疫反应性）的水平升高。相对于正常肺，NCI-H209细胞产生正常量的p53 mRNA。NCI-H209细胞可以用于3D细胞培养、癌症和免疫学研究。 |
| 二、NCI-H209 [H209]细胞培养操作 | |
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.混匀细胞，收集细胞培养基，900rpm离心3-5min，弃上清； 2.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 3.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 部分悬浮细胞会附着瓶底，轻轻晃动培养基或者吹打细胞面就会脱落，不需要胰酶消化。 建议使用培养皿培养，更适合吹打细胞操作，吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
| 三、NCI-H209 [H209]细胞冻存操作 | |
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80 度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20 度静置 2h 后转入-80 度过夜，第二天转入液氮保存。 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
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