HSC-T6(大鼠肝星形细胞)

一、HSC-T6细胞基本属性
细胞名称	HSC-T6(大鼠肝星形细胞)
细胞别称	HSCT6
细胞货号	SNL-200
来源	肝；SV40转化；Sprague-Dawley；雌性
细胞形态	上皮细胞样(圆形或卵圆形或梭形)
细胞类型
生长特性	贴壁细胞
收录	KCB
生物安全等级	2
致瘤性
培养条件	DMEM+10% FBS+1% P/S
培养环境	37℃；5% CO2；饱和湿度
细胞简介	HSC-T6大鼠肝星状细胞系是从老年的雄性Sprague-Dawley繁殖大鼠SV40大T抗原转化的原代星状细胞中分离的永生系。HSC-T6细胞可以作为研究肝维甲酸储存和代谢的模型。HSC-T6细胞最初（PubMed=10828080）报道是从雄性大鼠中建立的，但后来显示（PubMed=35681478）具有雌性核型。
二、HSC-T6细胞培养操作
换液周期	2-3天
培养基体积	T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
传代比例	1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定）
传代方法	1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养；
注意事项	不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
三、HSC-T6细胞冻存操作
冻存液配方	92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格	200-300万/ml，1ml每管
冻存方法	1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存
注意事项	冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案

Tips：1.细胞贴壁较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间； 2.细胞内黑色颗粒偏多，传代会有部分到培养基内，注意及时清除细胞外黑色碎片；

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