DMS 53(人肺癌细胞)
DMS 53(人肺癌细胞)
HBMSC-SV40(人骨髓间充质干细胞永生化)
HEK-SV40-luc(人表皮角质形成细胞永生化（luc标记）)
HepG2-GFP(人肝癌细胞（GFP标记）)
| 一、CAL-27细胞基本属性 | |
| 细胞名称 | CAL-27(人舌鳞癌细胞) |
| 细胞别称 | Cal-27；CAL27；Cal27；CAL27；Cal27；CentreAntoineLacassagne-27 |
| 细胞货号 | SNL-179 |
| 来源 | 舌鳞癌；男性；56岁 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样(多边形或卵圆形上皮样) |
| 细胞类型 | |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 收录 | ATCC |
| 生物安全等级 | 1 |
| 致瘤性 | Yes, solid tumors developed within 6 weeks in nude mice inoculated with 2 x 106 cells subcutaneously |
| 培养条件 | DMEM+10% FBS+1% P/S |
| 培养环境 | 37℃；5% CO2；饱和湿度 |
| 细胞简介 | CAL-27细胞是1982年由J.Gioanni（法国尼斯塞德克斯安托万·拉卡萨涅中心）从一位56岁的白人男性舌中部病变患者治疗前的组织中分离出来的上皮细胞，是一种非整倍体细胞，染色体模式数43。CAL-27细胞是上皮性的多边形细胞，胞质高度颗粒状，细胞角蛋白强阳性。CAL-27细胞细胞在半固态培养基中生长不好。CAL-27细胞在VP16（依托泊苷）、CCNU（1-[2-氯乙基]-3-环己基-1-亚硝基脲）、VM26（替尼泊苷）、ADM（阿霉素）、CPA（环磷酰胺）和MTX（甲氨蝶呤）存在下，观察到胸腺嘧啶掺入的显著抑制。CAL 27细胞对VDS（硫酸长春地辛）、CDP（顺式铂）或ACTD（放线菌素D）的治疗有抗性。1993年12月提交给ATCC的培养物被发现被支原体污染，通过用BM Cycline治疗21天治愈后代。CAL-27细胞可以用于3D细胞培养和癌症研究。 |
| 二、CAL-27细胞培养操作 | |
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未完全脱落时加2-3ml完全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的完全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足完全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态。 |
| 三、CAL-27细胞冻存操作 | |
| 冻存液配方 | 92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%完全培养基+8%DMSO(高手推荐); |
| 冻存规格 | 200-300万/ml，1ml每管 |
| 冻存方法 | 1.消化并离心获得细胞沉淀后，加配置好的冻存液轻轻重悬细胞； 2.将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管； 3.将冻存管转入程序冻存盒，放入-80度冰箱过夜，第二天转入液氮保存；没有程序冻存盒的实验室，加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min，再-20度静置2h后转入-80度过夜，第二天转入液氮保存 |
| 注意事项 | 冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性，若有异常，及时调整实验方案 |
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