支原体检测试剂盒MJ108 酶离者试剂盒

产品信息：

检测准备：

本产品检测支原体需自备如下仪器与耗材：PCR仪、琼脂糖凝胶电泳系统、凝胶成像仪、1.5 mL无DNA EP管、超纯水、0.2 mL PCR管或PCR八连管、琼脂糖、TAE/TBE、DNA Marker（推荐100 bp ladder）。

使用方法：

1.收取待检液体样品（如贴壁细胞生长至80%左右，24h内未换液的培养上清），取200uL在1.5mL 无DNA EP管中，100℃煮10 min；

2.将煮过的待检样品离心，12000 rpm/ 2-5min；

3.解冻支原体检测试剂，轻轻敲打管壁混匀;

4.取10uL支原体检测试剂加入PCR管中，再加入离心后的待检样品上清2.5uL混匀后瞬离，阳性对照和阴性对照（超纯水）也按此操作；

5.按照以下程序跑PCR：

94 ℃ 4 min

94 ℃ 30 s

56 ℃ 30 s

72 ℃ 30 s 30 cycles

72 ℃ 10 min

4 ℃ ∞

6.电泳检测：取10 μL PCR产物，1.5 %琼脂糖凝胶（含GelRed/GelGreen）110 V/ 25 min；

7.凝胶成像仪拍照记录；

8.结果判读：

阳性：470 bp处出现清晰条带（与阳性对照同位置）；

阴性：470 bp处无条带，阴性对照亦应无条带；

无效：阳性对照无条带或阴性对照470 bp处出现条带。

注意事项：

1.本产品阳性对照为灭火支原体，但仍需视为潜在污染源，建议独立区域加样；

2.本产品为无菌状态，使用本产品时应注意无菌操作，避免污染；

3.本产品仅供科学研究使用。