安捷伦|Agilent|Bio-Monolith Protein A 和 Protein G 亲和色谱柱|Bio-Monolith 重组 Protein A，4.95 x 5.2 mm|货号 5190-6903|1 Each

亲和色谱分析是一种基于固定相上共价结合的配体与目标分析物之间的特异性相互作用的高选择性分离技术。 亲和色谱分析非常适合纯化复杂混合物中的特定组分。当混合物流经色谱柱时，只有与配体具有强结合亲和力的分子会被保留，其他成分则被洗脱去除。 然后，使用具有不同 pH 或离子强度的流动相进行洗脱，该流动相会破坏配体-分析物间的相互作用，从而获得目标分析物。

Protein A 和 Protein G 常用于抗体纯化，因为它们能够与某些免疫球蛋白 G (IgG) 亚类的 Fc 区域结合。 某些类型的单克隆抗体对 Protein A 和 Protein G 均具有强亲和力，如人 IgG1、IgG2、IgG4 和小鼠 IgG2a。Protein A 和 Protein G 对小鼠 IgG2 和 IgG3 均具有中等亲和力。 值得注意的是，Protein G 与 Protein A 具有互补的选择性，这拓宽了其在抗体纯化工作流程中的实用性。与 Protein A 不同，Protein G 能够与人 IgG3 和小鼠 IgG1 强烈结合。

与填充有许多球形硅胶或聚合物颗粒的传统 HPLC 色谱柱不同，整体式色谱柱由单个连续的棒状多孔结构组成。 该结构具有高度连通的通道网络和高比表面积，可实现高结合容量。通道间的高连通性大大减少了扩散效应，从而提高了分离度。均一的孔结构确保液流高效流经色谱柱，有效降低了流阻和背压。

整体柱形式的 Protein A 和 Protein G 色谱柱具有高选择性，可在短短 60 秒内实现快速、高通量的 mAb 滴度测定。整体柱的均匀微孔结构可实现高流速，同时保持低背压。 在 pH 7.2–7.6 范围内，Protein A 和 G 与 IgG 的 Fc 段特定区域结合。 然后利用梯度洗脱，将流动相 pH 降至 2.6，从而实现高回收率。