pNZ8149

pNZ8149 – broad host range vector; lacF for food grade selection for growth on lactose; nisA promoter followed by an NcoI site for translational fusions at the ATG. Contains a terminator after the MCS. Sequence adaptation for cloning in NcoI can result in a change in the second amino acid of a protein (no reference, example: (Mierau et al., 2005)).

1. pNZ8149质粒必须在NZ3900乳酸菌中扩增和复制。HonorGene有NZ3900乳酸菌菌株出售，您需要的话可以联系我们订购NZ3900乳酸菌菌株。

2. 含有pNZ8149质粒的NZ3900乳酸菌培养条件：M17培养基，额外添加5g/L葡萄糖；30℃，有氧。

3. pNZ8149质粒提取注意事项：

（1）菌液多准备一些，多管合一，以尽量提高质粒浓度。

（2）质粒提取步骤和常规质粒一样，但是需要在加入溶液I的时候，事先加入溶菌酶，孵育1h后再加溶液II裂解。

（3）溶菌酶使用时不需配制母液，直接称取一定量粉末加入溶液I中即可，浓度大于10mg/mL就行。