「MTT/噻唑蓝细胞增殖细胞活性药物筛选」价格、参数、图片

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产品特点：

MTT主要用途：
1．药物（或其他处理方式）对体外培养的细胞活性的测定；
2．细胞增殖及细胞活性测定。
MTT广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的药物筛选、细胞活性试验以及肿瘤敏感性测定等。

产品详情：

货号：CT-MTT-1

包装量：1.0克MTT粉末

价格：288元

储存：+4°C，避光

MTT全称为3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，汉语化学名为 3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐，商品名：噻唑蓝，是一种黄颜色的染料。在水中的溶解度为20 mM。

技术资料：

CAS No：298-93-1

分子量：414.32

分子式：C18H16N5SBr

纯度：>98%

MTT主要有两个用途：

1．药物（或其他处理方式）对体外培养的细胞活性的测定；

2．细胞增殖及细胞活性测定。

MTT实验的原理：

活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能将MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲臢（Formazan），并沉积在细胞中，而死细胞不能进行这个反应。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臢，用酶标仪在570 nm波长处(490 nm -570 nm之间都可以）测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值（OD值）来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强（如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小）。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的药物筛选、细胞活性试验以及肿瘤敏感性测定等。它的特点是灵敏度高、经济实惠。

MTT实验方法（供参考）

一、MTT的配制

通常配制的MTT浓度为5 mg/ml。可以称取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸盐缓冲液（PBS）或无酚红的培养基中，用0.22 μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，放4℃ 避光保存，两周内用完。也可分装后避光保存在-20℃长期保存，并避免反复冻融。在配制和保存的过程中，容器**用铝箔纸包住。

二、实验步骤

A、贴壁细胞

1、收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，向96孔板每孔加入100ul铺板，调节待测细胞密度使每孔含1000-10000个细胞，边缘孔用无菌水或PBS填充。

2、在5%CO2，37℃条件下孵育。原则上，细胞贴壁后即可加药，或两小时，或半天时间，或过夜。一般常在前一天下午铺板，次日上午加药。一般设5-7个药物梯度，每孔100ul，一般设3个复孔即可，复孔越多结果越准确。同时设置调零孔（仅含培养基和药物溶解介质）和对照孔（仅含细胞和药物溶解介质）。

3、置于5%CO2，37℃条件下，孵育时间根据药物的作用特点来决定，一般24-72小时，中途可在倒置显微镜下观察细胞状况。

4、每孔加入20ul MTT溶液（5 mg/ml，即0.5% MTT），37℃继续培养3-4小时。若药物能够与MTT反应，可先离心后弃去培养液，小心用PBS洗2-3遍后，再加入含MTT的培养液。

5、终止培养，小心吸去孔内培养液。

6、每孔加入150 ul二甲基亚砜，置摇床上低速振荡10分钟，使结晶物充分溶解。在570nm（可用630nm校准）测量各孔的吸光值。

B、悬浮细胞

1、收集对数期细胞，调节细胞悬液浓度1E6/ml，依次将①细胞悬液50ul（即5E4cell/孔），②待检测药物50ul，共100ul加入到96孔板（边缘孔用无菌水或PBS填充）。一般设5-7个药物梯度，一般设3个复孔即可，复孔越多结果越准确。同时设置调零孔（仅含培养基和药物溶解介质）和对照孔（仅含细胞和药物溶解介质）。