新型复合硅技术固相萃取

Microlute® CSi: 新型复合硅技术在固相萃取中的评估 

固相萃取 (SPE)、LC-MS、制药、复合硅胶、C18、Microlute® CSi

简介： 

固相萃取 (SPE) 是色谱分析中样品制备的黄金标准。其功能在于捕捉、净化和浓缩样品，同时去除干扰化合物，以获得可靠且灵敏的色谱数据。

传统的SPE产品采用松散填装的形式，将活性树脂置于多孔滤网之间。然而，这类产品存在通道、树脂质量不一致及空隙问题，导致回收率降低和重现性差。

Microlute® CSi 产品采用一种新型复合技术，将多孔塑料和色谱SPE树脂混合。这项技术设计旨在消除由传统松散填装SPE板的固有问题和不一致填装引起的问题。

本应用说明中的数据对C18树脂制作的10 mg松散填装板和10 mg复合板（Microlute® CSi）的SPE结果进行了比较，二者均使用同一批次的C18树脂制成。

图1：复合技术的示意图 

材料与方法： 

选择了一系列由酸性、碱性和中性分析物组成的化合物。每种化合物的选择都基于其固有的物理和化学特性，如pKa和LogP。使用多种化合物可以更详细地比较每种板格式。采用适当的SPE方法对每种化合物类别共进行了六次重复测试。

SPE方法遵循典型的10 mg反相方法：

条件：500 µL 甲醇平衡：500 µL 水加载：500 µL 样品（pH值调整以中和酸性和碱性化合物的电荷）清洗：500 µL 水洗脱：2 x 250 µL 甲醇（pH值调整以带电酸性和碱性化合物）

*：调节 pH 值以中和酸性和碱性化合物上的任何电荷

**：调节 pH 值以给酸性和碱性化合物充电

洗脱的样品经干燥处理并重溶后，然后用连接到Agilent单四极杆MS/MSD的Agilent 1260 HPLC高效液相色谱仪进行分析。

表1:测试中使用的分析物的属性[1] 

结果与讨论：

回收率 

数据表明，两种板在所有11种化合物的分析物回收率方面均表现良好。使用复合板和松散填充板的平均回收率分别为91%和88%，这表明SPE技术在色谱样品制备中的有效性和实用性。

图2：每种分析物的百分回收率，采用六个重复试验的平均回收率计算得出

重现性 

两种板的重现性差异显著，使用复合板时重现性有显著改善。通过计算测试化合物的平均百分比相对标准偏差（% RSD），松散填充板的RSD约为6%，而复合板（Microlute® CSi）的RSD不到2%。

图3：每种分析物使用六个重复样本进行回收的相对标准偏差百分比。

图4：传统散装产品的常见问题

以上数据表明，复合硅胶板在所有测试的11种化合物中的表现出显著更高的重现性。松散填充板的较低回收率和较差的重现性可归因于此工艺中固有的色谱介质填充不一致的问题（详见图4）。Microlute® CSi采用的独特固定技术，确保每个孔的床重一致，液体流动佳，板与板之间保持一致。这确保了溶液和分析物与活性色谱树脂之间的的可预测相互作用。

结论： 

在本研究中，10 mg Microlute® CSi C18复合硅板用于SPE在所有测试化合物中均表现出优秀的重现性和回收率。复合技术的均匀性使活性介质均匀分布并放大化结构内的相互作用，从而产生非常一致的数据。如本短期研究所示，新型复合格式增强了回收率，并且与传统的松散填装板格式相比，重现性可提高至3倍。

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