猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体检测试剂盒

一、猪伪狂犬gE抗体检测试剂盒

通用名：猪伪狂犬病毒gE蛋白IgG抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：Diagnostic Kit for gE Antibodies to Porcine Pseudorabies virus (ELISA)

二、包装规格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒

三、预期用途 伪狂犬病是由伪狂犬病毒(Pseudorabies Virus，PRV)引起的一种传染病，导致怀孕母猪流产死胎、种猪不育、仔猪发病死亡等综合症候群。该病免疫预防用的疫苗为gE基因缺失疫苗（也有联用gI、TK基因缺失）,因此检测gE蛋白的抗体可作为野毒感染的指标。

猪伪狂犬gE抗体检测试剂盒用于检测猪血清中抗伪狂犬病毒gE蛋白的抗体，区别临床野毒感染猪和用gE基因缺失疫苗免疫的猪。

四、猪伪狂犬gE抗体检测试剂盒原理

猪伪狂犬gE抗体检测试剂盒系由预包被猪伪狂犬病毒重组gE蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成，应用酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清、血浆样本中猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本，经温育后若样品中含有猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后；再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合；再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关；加入终止液终止反应后，产物变为黄色；用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，即可知样品是否含有猪伪狂犬病毒gE蛋白抗体。

五、猪伪狂犬gE抗体试剂盒组成

酶标板、酶标记物、样品稀释液、浓缩洗涤液、底物液A、底物液B、阳性对照、阴性对照

六、储存及有效期

于2～8℃避光保存，有效期为12个月。

包被板开封后请于2～8℃避光保存，避免受潮。使用期限为2个月。

【检验方法】

1.使用前将试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条，设阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3.阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入样品稀释液90μl，再加入稀释后的血清10μl。

注：样本稀释比例相当于1:100。

4.混匀，盖好盖板膜，置37℃（推荐水浴）避光反应30分钟。

5.甩去孔内液体，每孔加350μl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，一次拍干。

6.每孔加酶标记物100μl，盖好盖板膜，置37℃避光反应30分钟。

7.洗涤，同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，盖好盖板膜，置37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。

【参考值】 实验正常的情况下，阴性对照≤0.10，阳性对照≥0.6。

【检验结果的解释】

1.样品A值≥0.38为阳性；样品A值在0.2到0.38之间为可疑；样品A值＜0.2为阴性。

2.本实验结果为阳性表明该猪可能有野毒感染，或是用非gE基因缺失疫苗免疫的。

【试验方法的局限性】

本检测结果仅供筛查，不作为确诊依据。