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Advance 人多能干细胞培养基(埃泽思生物AC-1001001)
- 品牌:上海埃泽思
- 型号/货号: 基础培养基 400mL,添加剂 100m/AC-1001001
- 产地:上海 宝山区
- 供应商报价:¥2526
- 上海埃泽思生物科技有限公司 更新时间:2024-09-13 10:17:09
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销售范围售全国
入驻年限第7年
营业执照已审核
- 同类产品ES\iPS细胞类(12件)
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产品特点
- Advance 人多能干细胞培养基是埃泽思生物科技有限公司(Applied Cell®)自主研发的一款营养成分更丰富,适用于大多数多能细胞系培养,且适用于 iPS 建系。该培养基适用于 Essential 8 系统和 mTeSR培养系统,为无滋养层培养、无血清、化学成分明确。可应用于干细胞传代,内含干细胞保护因子,防止细胞的凋亡、分化,对细胞具有良好的保护作用。GMP 级别生产车间,严格执行 cGMP 操作标准,各项指标优于行业标准。
详细介绍
Advance 人多能干细胞培养基
产品基本信息
产品名称
Applied CellTM Advance人多能干细胞培养基
货 号
AC-1001001
规 格
基础培养基400mL,添加剂100mL
保存条件
基础培养基2-8℃,添加剂-20~-80℃;混合后2-8℃
使用范围
人多能干细胞扩增、传代
保质期
12个月
产品简介
Advance 人多能干细胞培养基是埃泽思生物科技有限公司(Applied Cell®)自主研发的一款营养成分更丰富,
适用于大多数多能细胞系培养,且适用于 iPS 建系。该培养基适用于 Essential 8 系统和 mTeSR培养系统,
为无滋养层培养、无血清、化学成分明确。可应用于干细胞传代,内含干细胞保护因子,防止细胞的凋亡、分化,
对细胞具有良好的保护作用。GMP 级别生产车间,严格执行 cGMP 操作标准,各项指标优于行业标准。
产品特性
适用于 E8 系统和 mTeSR 系统培养的人多能干细胞
成分明确,批间差小
无需滋养层细胞
营养更丰富,适用于大多数细胞系培养,且适用重编程过程细胞培养
产品内容
组分组分
规格
数数量量
运运输输
Advance hPSC Medium Basal Medium
Advance人多能干细胞培养基基础培养基
400 mL
1 瓶
冰袋
Advance hPSC Medium Supplement
Advance人多能干细胞培养基添加剂
100 mL
1 瓶
干冰
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实验准备 Advance 人多能干细胞培养基配制
1) 2-8℃解冻 Advance 人多能干细胞-添加剂,融化后上下晃动混匀,按实际用量进行分装,立即使用
或储存于-20~ -80℃,避免反复冻融;
2) 按 1:4 的比例将 Advance 人多能干细胞-添加剂(100mL)加入到 Advance 人多能干细胞-基础培
养基(400mL)中,混合均匀即成为人多能干细胞培养基。混匀后的人多能干细胞培养基可在 2-8℃ 稳
定储存 2-3 周,不建议使用配制已超过 3 周的人多能干细胞条件培养基。
3) 实验试剂平衡:人多能干细胞培养基实验前放置室温避光平衡;PBS,消化液等 37℃加热。
注意:培养基中含有因子,不要 37℃水浴加热。
操作方法(以下步骤皆应在无菌条件下操作)
hPSC细胞复苏
1. 实验操作步骤:
1.1. 基质胶包被培养板:取出 6 孔板/12 孔板,每孔内加入 1 mL/0.5 mL 即用型基质胶
(AC-1001007),轻轻晃动 6 孔板/12 孔板使基质胶完全覆盖皿底,置于 37℃培养箱中孵育
1h~2h,实验前拿出并置于超净工作台/生物安全柜中室温下平衡 20min。如果暂时不用,可用
Parafilm 封口后 2-8℃ 储存,并于 1 周内使用。
注意:①一支冻存的干细胞的数量在 1×10
6cells/mL 左右,对应 6 孔板 1 孔;②即用型基质胶对
温度敏感,即用即拿,用完后立即放回 4℃冰箱保存,且勿用手直接触碰基质胶液面所及的瓶身,
影响基质胶质量。
1.2. 先将 2~3mL 的干细胞培养基加入 15mL 离心管中备用。
1.3. 解冻:将从液氮中取出的冻存管快速浸入 37℃温水中,快速摇动,使其在 1~2min 内快速解冻;
注意:细胞从液氮中拿出的速度要快,尽量减少其暴露在室温中的时间。
1.4. 离心:冻存管中的冻存液解冻后,将其逐滴加入含有干细胞培养基的 15mL 离心管中,将 15mL
离心管置于低速离心机中配比平衡后,1200rpm 离心 3min;
1.5. 重悬:离心后弃上清加 1mL Advance 人多能干细胞培养基对干细胞沉淀进行吹吸混匀,吹吸
3~5 次左右。
1.6. 接种:吹吸均匀后,将已经平衡好的即用型基质胶弃掉,将吹打均匀的干细胞悬液加入到已经包
被好的 6 孔板中,并补全每孔 2mL 培养体系。
注意:因培养基中活性成分只足够维持一天,所以每24h应及时更换新鲜培养基。
hPSC细胞传代
2. 实验具体操作步骤:
2.1. 清洗:吸掉原有培养基,贴壁缓慢加入 1 mL PBS 缓冲液并轻轻晃动,然后沿培养皿边缘吸去 PBS缓冲液;
2.2. 消化:在 6 孔板中加入 2mL/孔人多能干细胞消化液(AC-1001008)使之覆盖皿底,并置于 37℃培养箱中 2~5 min;
注意:消化时间依据干细胞生长密度,消化时间略有不同,根据经验一般建议时间 2-5min。消
化过程中可以拿到倒置显微镜下观察细胞消化情况,若在显微镜下观察到大部分克隆边缘以及克
隆内部细胞间出现间隙,即可吸掉消化液终止消化。
2.3. 吹打:吸掉消化液后,加入 2mL Advance 人多能干细胞培养基,用移液枪扇形吹打培养皿底,
轻柔吹打 3~5 次,使皿底干细胞集落脱落,并将其并转移到 15mL 离心管中;
注意:吹吸皿底细胞的力度要轻柔,吹打脱落和吹吸混匀的次数在 3~5 次为宜,尽量避免形成
单细胞。如有少量细胞无法从皿底脱落,属于正常现象。如有大量细胞无法从皿底脱落,需延长消化时间。
2.4. 离心:1200rpm 离心 3min;
2.5. 接种:弃上清,用干细胞培养基吹打细胞 5-10 次,吸掉包被培养板中的基质胶,并将细胞悬液
加入到培养板中,且补全每孔 2mL 的培养体系。
注意:吹打细胞要温柔,并且吹打次数不要超过 10 次,并且
2.6. 换液:从传代的时间开始每 24h 换液一次。
注意:因培养基中活性成分只足够维持一天,所以每 24h 应及时更换新鲜培养基。
hPSC细胞冻存
3. 实验具体操作步骤:
3.1. 清洗:同 2.1;
3.2. 消化:同 2.2;
3.3. 吹打:同 2.3;
3.4. 离心:同 2.4;
3.5. 重悬:离心后弃上清,加入 2 mL ES/iPS 细胞冻存液(AC- 1001012)对干细胞沉淀进行吹吸
混匀,吹吸 3~5 次后,将其加入到冻存管中;
注意:冻存液即用即拿,及时放回 4℃冰箱。
3.6. 记录:在冻存管上标记冻存细胞种类、时间、操作者及细胞批次。
3.7. -80℃冰箱冻存:冻存管置于-80℃冰箱过夜。
注意:冻存管放置于-80℃冰箱时,要将冻存管直立放置,切忌冻存管斜放或横放。
3.8. 液氮冻存:24 小时后将-80℃冰箱中的细胞转移至液氮中长期冻存。
细胞形态图
质量控制
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