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Hifair<sup>®</sup> V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit
- 品牌:翌圣生物
- 产地:
- 供应商报价:面议
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翌圣生物科技(上海)股份有限公司
更新时间:2024-12-24 09:03:45
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销售范围售全国
入驻年限第1年
营业执照已审核
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详细介绍
Hifair® V nCov Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit是以RNA为模板进行多重定量PCR反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量PCR在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。
本试剂盒利用耐热Hifair® V Reverse Transcriptase高效合成第一链cDNA,并利用UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的MP Buffer,Enzymes Mix等,缓冲液中已含有Mg2+和dNTP等,并添加了有效抑制非特异性PCR扩增的因子和提升多重qPCR反应扩增效率的因子,能够保证引物扩增效率的同时,进行多达四重的反应。
产品组分组分编号
组分名称
产品编号/规格
13110ES60 (100 T)
13110ES80 (1000 T)
13110ES92 (10000 T)
13110-A
2×Hifair® V MP Buffera,b
1.2 mL
12 mL
120 mL
13110-B
Hifair® V Enzyme Mixc
100 μL
1 mL
5 mL×2
13110-C
RNase Free H2O
1.2 mL
12 mL
120 mL
【注】a) 2×Hifair® V MP Buffer为Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer的简写。
b) 不含Rox reference dye。如需,推荐使用货号10200ES产品。
c) Hifair® V Enzyme Mix主要包含有耐热Hifair® V Reverse Transcriptase、RNase inhibitor和UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase。
适用机型ABI系列:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus; 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 and 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;
Bio-Rad系列:Bio-Rad CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;
Roche系列:Roche Applied Science LightCycler 480, LightCycler 2.0; Lightcycler 96;
其他系列:Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;
Eppendorf Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;
Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler; Illumina Eco qPCR.
运输与保存方式冰袋运输。-20℃保存,有效期1年。本品避免反复冻融。建议分装保存。
注意事项
1. 实验过程中请使用RNase free耗材。
2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
3. 本产品仅作科研用途!
反应体系
组分
体积(μL)
体积(μL)
终浓度
2×Hifair® V MP Buffer
12
15
1×
Hifair® V Enzyme Mix
1
1.5
-
Primer/Probe Mix (10 μM)
1-4
1-4
0.4 μM
模板 RNA
1-5
1-10
-
RNase Free H2O
To 25
To 30
-
【注】:使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。
a) 引物浓度:Primer Mix中包含多对引物,通常每条引物终浓度为0.4 μM,也可以根据情况在0.1-1.0 μM间进行调整。
b) 探针浓度:Probe Mix中包含多条不同荧光信号的探针,每条探针的浓度可根据具体情况在50-300 nM间调整。
c) 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。
d) 反应体系:推荐使用25 μL、30 μL或50 μL,以保证目的基因扩增的有效性和重复性。
e) 体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头。避免交叉污染和气溶胶污染。
标准扩增程序
反应阶段
温度
时间
循环数
1
逆转录
50℃a
10 min
1
2
预变性
95℃
5 min
1
3
扩增反应
95℃
15 sec
45
60℃b
30 secc
【注】
a) 逆转录:42℃或者50℃均可,时间10-15 min。
b) 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。CDC官方推荐的ORF1ab和N引物,退火温度建议≥60℃。
c) 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。
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货号
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