5-ethynyl-2’-deoxyuridine(EDU) 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷

EdU可用于动物活体注射，对生物体无明显副作用且稳定性较好，可将目标组织制备为石蜡或冰冻组织切片后检测；EDU也适用于体外培养的细胞增殖检测，适用于小鼠，大鼠及其他动物模型的各种组织器官(血管除外)的EdU细胞增殖检测。

与BrdU检测方法相比，其化学反应检测方法反应快，效率高，反应时间仅需几分钟，无需DNA变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育，能够更好地保护细胞形态，更简单、灵敏、快速、准确。EdU检测方法用量更少，只需十分之一的用量即可获得与BrdU检测试剂盒相同甚至更好的检测结果。

产品性质

运输和保存方法

冰袋运输。粉末在-20 ℃避光保存，1年有效。配置成溶液，-80 ℃避光保存，6个月有效；-20 ℃避光保存，1个月有效。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）该品对皮肤有不可逆损伤的可能性。使用时应穿防护服和戴手套。应避免吸入本品的粉尘。

3）本产品仅作科研用途！

操作步骤

1、EDU储存液配置（浓度:10 mM）

取5 mg的EdU粉末，加入到1.98 mL的蒸馏水中，涡旋震荡，充分混匀，此时浓度为10 mM（或者2.5 mg/mL）。然后分装保存在-20 ℃冰箱中，可稳定保存1个月。
 

2、EdU标记细胞

注意：EdU的标记浓度应根据所用的细胞类型做相应的优化选择，推荐客户以10 μM的EdU初始浓度进行摸索。细胞培养基、细胞生长密度及细胞类型和其他实验条件都有可能影响细胞的标记效果。预实验中我们建议客户设置一系列的EdU浓度梯度，以确定最佳的合适您的细胞的实验浓度。

2.1 以每孔4×10³~1×10⁵细胞接种于96孔板中，进行您所需要的药物处理或者其他刺激处理。

2.2 准备一份2×的EdU工作液：以完全培养基稀释10 mM的储液至合适的工作浓度。建议您以10 μM的初始工作浓度开始预实验。

2.3 预热2×的EdU工作液，加入等体积的培养基，使浓度变为1×(如：需要得到10 μM的终浓度，应以新鲜培养基等体积加入到20 μM的EdU工作液中)。

2.4 合适时间合适条件孵育细胞，EdU孵育细胞的时间可以直接用作测定细胞DNA合成的指标，时间点选择以及孵育时间的长度取决于细胞生长速率。通过短暂的EdU孵育进行的脉冲式标记细胞可以用于研究细胞周期动力学。
 

3、EdU检测

EdU检测需用到Yefluor 647 EdU Flow Cytometry Assay kit（货号：40277ES）、Yefluor 488 EdU Flow Cytometry Assay kit （货号：40278ES）等染色试剂盒，进行EDU检测。操作步骤请参考相关说明书。

活体标记

若要将EdU注射到小鼠等动物体内，进行荧光标记。建议EdU初始给药量为5mg/kg，稀释浓度为0.5~1 mg/mL。

表1:  EdU注射液配置参考

注：1)可采用PBS或生理盐水稀释；
      2)注射时可将EdU注射液进一步稀释，不会影响EdU的稳定性。

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