探针法加利福尼亚支原体实时定量PCR试剂盒

探针法加利福尼亚支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Californicum

货号：Mqt-cal-20      规格：20个反应

货号：Mqt-cal-50      规格：50个反应

货号：Mqt-cal-100     规格：100个反应

储存：-20度，避光保存，有效期一年。避免反复冻融。

试剂盒特点：

1，  特异性检测加利福尼亚支原体，与其他生物没有交叉反应。

2，  灵敏度高，检测极限相当于反应液中约含1个拷贝。

3，  使用的DNA聚合酶具有抗抑inhibit制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑inhibit制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，  带有阳性对照样品（组分C），可用于检验试剂盒有效性。

5，  带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

加利福尼亚支原体（Mycoplasma Californicum）是流行性仅次于牛支原体（Mycoplasma Bovis）的致病性牛寄生支原体，可引起乳腺炎、关节炎、肺炎等疾病，最初于1977年在美国加利福尼亚分离得到。除了乳腺之外，在子宫、肺、发炎的关节等处也可以分离得到加利福尼亚支原体。其引起的乳腺炎与牛支原体相比，传染性更强，症状更为严重，且对抗生素不敏感，如果没有及时隔离的话容易引起较大的经济损失。

传统的支原体检测采用体外培养法，体外培养条件较为苛刻，用时较长，一般需要7-10天时间，操作较为繁琐，并且需要特定的方法来进行鉴定，由于生长缓慢，所以容易受到其他细菌的干扰。高灵敏度和高特异性的PCR法可以有效克服这些缺点，其检测时间短，仅需几个小时即可获得结果。定量PCR法与普通PCR法相比，不仅可以精确定量，而且操作更为方便，更少受环境污染的影响。

本试剂盒选择RNA聚合酶基因作为靶点，特异性识别加利福尼亚支原体，与其他生物基因组不产生交叉反应。检测分布范围相似的16种支原体和20种常见细菌，未见假阳性结果。对281个样本进行检测，获得23个阳性样本，与基因测序结果完全一致，可见本试剂盒具有非常好的特异性。

本试剂盒包含热启动DNA聚合酶、dNTP（以dUTP代替dTTP）、引物、探针、阳性对照品、ROX染料，和用以防止残余DNA污染的UDG（Uracil- DNA Glycosylase，尿嘧啶-DNA-糖基酶），用户只需准备好DNA样品即可使用。

本试剂盒采用的DNA聚合酶源自极端嗜热菌（Thermus thermophilus），经改造后较普通的Taq酶具有更强的抗抑inhibit制能力和热稳定性。通过结合特异性单克隆抗体，在室温下DNA聚合酶活性被抑inhibit制。在PCR循环的热变性阶段，抗体受热被去除，此时DNA聚合酶活性恢复，因此获得“热启动”功能。热启动可减少残余DNA的污染，提高PCR扩增效率、灵敏度和目的片段产量。

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