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无外泌体血清

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详细介绍

产品名称:无外泌体血清(Exosome-depleted FBS,ExoDP-FBS)

保存条件:2 - 8℃(长期保存 -20℃)

运输条件:干冰

保存期限:12 个月

产品批号:见产品标签

无外泌体血清产品应用

大多数细胞的生长所需的标准培养基,都需要添加胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)作为其生长所需补充物。但是,FBS 来源于牛血清,其中天然含有大量的包括外泌体(exosome)在内的外源性细胞外囊泡(extracellular vesicles)。exosome其内含有独特的蛋白质与核酸分子包括mRNA、miRNA、rRNA和snoRNA等,exosome所含成份与其细胞来源密切相关,这也决定了exosome的功能特异性。但是,FBS相关的RNA会在分离细胞外膜泡RNA(exRNA)时一同被分离出来,这会对下游RNA分析造成干扰。因此,实验设计过程中采取减少FBS源RNA干扰的预防措施是非常必要的。

无外泌体血清适用外泌体研究。

上清收集建议:先用完全培养基让目的细胞长到80%融合,然后去掉培养基,用PBS清洗三次,更换无外泌体血清的培养基,然后培养2-3天(中间不换液),收集上清 ,收集标本后一周内提取外泌体。

无外泌体血清质检

  1. 血清中外泌体的纳米粒子跟踪分析(Nanoparticle Tracking Analysis,NTA)分析外泌体去除率

正常源血清与 ExoDP-FBS 分别先经过 0.22μm 针式过滤器过滤(Millipore),然后通过贝克曼超速离心机(Beckman Coulter Optima L-100XP)超速离心,所获沉淀以磷酸缓冲液(PBS)pH7.2重悬备用。Nanosight v.2.3 (Malvern Instruments)进行 NTA 分析。

  1. ExoDP-FBS 促进细胞的生长和存活

实验证明含 ExoDP-FBS 血清的培养基与含正常源血清的培养基相比,其对细胞的生长和存活都具有同等甚至更好的促进作用,而与无血清培养基相比则显著促进细胞的增殖及存活。

无外泌体血清使用说明.

本产品已经过无菌处理,可直接用于细胞培养。使用前请将本产品放置于 2-8℃自然解冻,解冻后可置于 2-8℃保存,于一个月内使用,或分装后于-20℃冻存,但请勿多次反复冻融。如遇急用情况,可置于 37℃水浴解冻,时间不宜过久,以免影响血清质量。使用本产品,请勿进行高温热灭活。使用本产品时,以正常血清同等用量添加到基础培养基(如 DMEM, 1640 培养基等)中,通常为 10%的培养基用量。

 

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