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热敏UDG不含甘油Uracil DNA Glycosylase(UDG),Heat-Labile(1 U/μL,Glycerol-Free)

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详细介绍

热敏UDG(尿嘧啶-DNA 糖基化酶)能催化水解含有尿嘧啶的DNA链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键,释放游离尿嘧啶。热敏UDG酶与普通UDG酶相比,避免了常规UDG酶灭活后可能存在的残留活性在常温下对含dU扩增产物的降解作用。本产品在室温下起作用,且对温度敏感、易于灭活。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10707ES60

(100 U)

10707ES76

(500 U)

10707ES90

(5 KU)

10707ES92

(10 KU)

10707

Uracil DNA Glycosylase (UDG), Heat-Labile (1 U/μL)

100 μL

500 μL

5 mL

10 mL

 

产品应用

1. 去除含dUPCR产物气溶胶污染。

2. 去除单链或双链DNA尿嘧啶碱基。

 

酶活定义

25℃30 min内完全降解1 μg含有尿嘧啶的dsDNA所需酶量定义为1个活性单位 (U)

 

失活方式

94℃2-5 min

 

运输储存方法

冰袋运输。4℃保存,有效期1年。

 

注意事项

1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 热敏UDG在多数PCR反应缓冲液中均有活性。

 

应用实例

1. 按下列组份配制PCR反应液:

试剂

体积

10×PCR Buffer (Mg2+ Plus)

5 μL

25 mmol/L MgCl2

3 μL

dUTP

0.6 mmol/L

dCTP / dGTP/ dATP

0.2 mmol/L each

模板DNA

Optional

引物1 (10 μmol/L)

2 μL

引物2 (10 μmol/L)

2 μL

Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5 μL

Heat-Labile UDG (1 U/μL)

1 μL

ddH2O

To 50 μL

【注】:根据实验需要,dUTP终浓度可在0.2-0.6 mmol/L之间调整。可选择性掺入0.2 mmol/L dTTP

2. PCR反应:

反应温度

反应时间

循环数

目的

25℃

10 min

1

降解含U模板

94℃

2 min

1

UDG酶失活,模板预变性

95℃

10 sec

30-35

变性

60℃

20 sec

退火

72℃

30 sec/kb

延伸

72℃

5 min

1

终延伸

【注】:25℃反应时间可以根据实验需要在5-10 min内调整。

 

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产品名称

产品货号

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HB220916

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