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激光共聚焦对研究信号通路有什么作用

琴爱皇    2017-05-11    共聚焦显微镜    浏览 345 次

精彩问答
fancy丶baby丶 发布日期:2017-05-12
  激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopeCLSM)近代先进细胞物医析仪器目前激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、态变化程等研究并提供定量荧光测定、定量图像析等实用研究手段结合其相关物技术形态、理、免疫、遗传等细胞物领域广泛应用 1. 组织细胞定量荧光测定   激光扫描共聚焦显微镜固定荧光染色标本单波、双波或波模式单标记或标记细胞及组织标本共聚焦荧光进行数据采集定量析,同利用沿纵轴移标本进行光切片叠加 形组织或细胞荧光标记结构总体图像,显示荧光形态结构精确定位 用于原位杂交、肿瘤细胞凋亡观察、单细胞水平 DNA 损伤及修复等定量析 2. 细胞间通讯研究   物植物细胞缝隙连接介导胞间通信细胞增殖化起着重要作用 激光扫描共聚焦显微镜通观察细胞缝隙连接转移测量传递细胞调控信息些离、物质 该技术用于研究胚胎发、殖发育、神经物、肿瘤发等程缝隙连接通讯基本机制作用用于鉴别缝隙连接作用潜毒性化物质 3. 细胞物理化测定   激光扫描共聚焦显微镜细胞形状、周、面积、平均荧光强度及细胞内颗粒数等参数进行自测定 能细胞溶酶体、线粒体、内质、细胞骨架、结构性蛋白质、DNA、RNA、酶受体等细胞内特异结构含量、组及布进行定量、定性、定及定位测定 4. 细胞内钙离 pH 值态析   激光扫描共聚焦显微镜技术测量若干种离浓度并显示其布效工具焦点信息效辨别使亚细胞水平显示离布能 利用荧光探针激光扫描共聚焦显微镜测量单细胞内 pH 种离(Ca2+、K+、Na+、Mg2+)细胞内浓度及变化 般说电理记录装置加摄像技术检测细胞内离量变化速度相较快,其图像本身价值较低,激光扫描共聚焦显微镜提供更亚细胞结构钙离浓度态变化图像,于研究钙等离细胞内力意义 4. 三维图像重建   传统显微镜能形二维图像激光扫描共聚焦显微镜通同品同层面实扫描像进行图像叠加构品三维结构图像 优点品立体结构析能十灵、直观进行形态观察,并揭示亚细胞结构空间关系 5. 荧光漂白恢复技术   该原理细胞内荧光激光漂白或淬灭失发光能力邻近未漂白细胞荧光通缝隙连接扩散已漂白细胞荧光逐渐恢复 通观察已发荧光漂白细胞其荧光恢复程变化量析细胞内蛋白质运输、受体细胞膜流组装等细胞物程 6. 程观察细胞迁移   细胞观察通需要定加热装置及灌注室保持培养液适宜温度及 CO2 浓度恒定 目前激光扫描共聚焦显微镜其光产效率已改善与更亮物镜更光毒性染料结合减每扫描激光束细胞损伤,用于数程定扫描,记录细胞迁移等细胞物现象 7. 细胞及物基础研究应用   激光扫描共聚焦显微镜应用照明针与检测孔共轭像效YZ焦外模糊像并标本各层别像细胞行损伤光切片种功能形象称显微 CTCLSM 贴壁单细胞或细胞群胞内、胞外荧光作定位、定性、定量及实析并胞内线粒体、内质、高尔基体、DNA、RNA、Ca2+、Mg2+、Na+ 等布、含量等进行测定及态观察使细胞结构功能面研究达水平 8. 肿瘤药物筛选研究应用   普通显微镜及电显微镜仅能肿瘤相关抗原进行定性析 CLSM 则单标记或者标记细胞、组织标本及细胞进行重复性荧光定量析肿瘤细胞抗原表达、细胞结构特征抗肿瘤药物作用及机制等面定量化 9. 血液病医免疫研究应用   激光扫描共聚焦显微镜观察免疫细胞系统树突状细胞、单核-吞噬细胞系统、自杀伤细胞、淋巴细胞准确细胞定位同效鉴定免疫细胞性质 10. 脑神经科应用   激光扫描共聚焦显微镜层扫描发现神经轴突内部结构连续性用激光扫描共聚焦显微镜能观察脑干组织神经轴突走向排除荧光显微镜由造些病理假象并且激光扫描共聚焦显微镜能观察神经轴突三维结构应用 CLSM 能观察普通光镜未能发现神经组织细微病变 11. 眼科研究应用   利用激光扫描共聚焦显微镜观察晶状体角膜、视膜、虹膜睫状体结构病理变化 12. 骨科研究领域应用   激光扫描共聚焦显微镜骨科研究领域应用现状表明CLSM观测骨细胞形态研究、骨细胞特异性蛋白(骨钙素)及骨细胞间相互作用具显著优势
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