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请问如何快速简便的提取毛发或者唾液中DNA

ccc13597972438    2009-02-26    血液核酸提取    浏览 552 次

请问如何提取毛发中的DNA或者唾液中的DNA,主要是为了贴近大众宣传科普,让大家了解到DNA是怎么提取出来的,请大家帮忙告诉一些简单的提取毛发或者唾液DNA的方法,或者有价格比较适中的... 请问如何提取毛发中的DNA或者唾液中的DNA,主要是为了贴近大众宣传科普,让大家了解到DNA是怎么提取出来的,请大家帮忙告诉一些简单的提取毛发或者唾液DNA的方法,或者有价格比较适中的试剂盒也行,十分感谢。
因为是到社区给百姓讲,所以用植物的DNA也不是太好,如果大家知道有从毛发和唾液中提RNA的试剂盒可以提供详细信息,包括几个反应,价格多少?谢谢

精彩问答
Fiend丶影 发布日期:2016-12-01
http://www.bioon.com.cn/reagent/Show_product.asp?id=215890
此为卖试剂盒的网址

毛发DNA提取:利用PCR缓冲液及蛋白酶K在PCR仪上对毛发进行消化,以此DNA为模板,扩增 mtDNA 12S rRNA基因的部分片段并进行序列测定,测序结果在GenBank上进行BLAST搜索,再利用DNAMAN软件进行同源性分析.

一定得是毛发或唾液吗,植物叶片行不?

1、取3g小麦叶片,加入液氮充分研磨后移至10ml离心管
2、在65℃预热的提取液中按3.8g/L加入Na Bisufite(sigma,S-9000),充分混匀,调节pH至8.0
3、在样品离心管中加入3ml提取液,用玻璃棒混匀
4、65℃水浴30min左右,期间可上下颠倒几次
5、冷却至室温后,加入约3ml氯仿、异戊醇(24:1)用力摇匀至充分乳化,放置在摇床上摇动15min左右
6、8000rpm离心6min(或者4000rpm离心30min)
7、倒出或吸取上清液,转移至一新离心管中,如有杂质,可用干净灭菌纱布过滤。加入体积约为上清液2倍的冰无水乙醇(这里为6ml),-20℃放置1h(如过夜效果更佳)
8、挑出DNA,并转入到10ml离心管中,如果勾出DNA有困难,可以低速离心使其沉淀。加入适量70%酒精,摇动洗涤10min,重复洗涤2-3次
9、冷冻干燥机中干燥DNA,加入适量TE(2ml左右)在65℃溶解,溶解过程中可每隔30min轻微涡旋一次,知道DNA完全溶解。溶解后,3000rpm离心2min,再将上清转移到新的1.5ml Eppendorf管,4℃或-20℃保存。DNA可直接用于Southern或PCR等操作
如需纯化,则进行下一步
10、将上述DNA溶液转移至10ml离心管中,加入3mlTE增大体积
11、加入10ulRNase(10mg/ml),室温处理0.5-1.0小时
12、加入等体积氯仿、异戊醇混匀,12000rpm离心5min
13、取上清转入新的离心管中,加入1、10体积的3mol/L NaOAc和2倍体积的冰无水乙醇,-20℃放置1小时或过夜
相当于先在酒精中加入1、20体积的3mol/L NaOAc,约1.23g
14、勾出DNA置于1.5ml Eppendorf管中,冷冻干燥后加入适量TE,65℃溶解,4℃或-20℃保存

DNA提取液pH8.0:
1mol/L Tris-HCl pH8.0 100mL 缓冲液调节pH
0.5mol/L EDTANa2 100ml 螯合镁离子
5mol/L NaCl 100ml 沉淀DNA
20%SDS 62ml 破坏细胞膜
ddH2O 638ml

0.5mol/L EDTA(500ml)
EDTANa2 93.05g
ddH2O 400ml
NaOH 8g
混匀,充分溶解后调pH至8.0

1mol/L Tris-HCl(1000ml)
Tris碱 121.1g
ddH2O 800ml
浓HCl 49ml
混匀,充分溶解后调pH至8.0,定溶至1000ml

TE(1000ml)
1mol/L Tris-HCl(pH 8.0) 10ml
0.5mol/L EDTANa2(pH 8.0) 2ml
加入ddH2O到1000ml,混匀,调pH至8.0,定溶至1000ml

大学实验课的操作,比试剂盒便宜多了,不过液氮的使用要注意安全,小心冻伤
全部评论
_无人懂他_ 发布日期:2009-02-27
这个你得去请教专业人士。
要几度才能注册 发布日期:2009-02-28
我自己做过一次DNA提取,当时是从嘴里提。

方法是:
1.生理盐水先暴力淑口,然后把水吐出来存好。
2.离心
3.提取DNA
hour丿寻寻幂幂 发布日期:2009-02-27
人的DNA一般式从血液中提的。从毛发和唾液中提那是破案用的……不太好找方法,应该有专业的试剂盒
私人专属辰 发布日期:2009-02-27
毛发比较难,除非有根部的毛囊细胞。
唾液细胞太少,一般是口含生理盐水,用牙轻咬嘴内两颊,在吐出,用离心机收集细胞,再用正常方法提取DNA。
yjtmgx10 发布日期:2009-02-27
毛发必须是带有毛囊的,也就是带有细胞的,唾液同样。
有DNA存在才能进行提取。
提取的方法很多,试剂盒也不过是把要用的试剂事先配好而已。
基本的原理是先把细胞破碎(比如CTAB,说白了大多是用洗洁精类似的表面活性剂),然后去蛋白,再沉淀DNA,Z后除去RNA。有时候DNA量很少,比如毛发和唾液,就直接把去蛋白后的DNA溶液除RNA,然后进行PCR。
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