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600bp的DNA大概要配多少浓度的胶跑电泳

琳琳iloveu    2008-11-17    DNA测序仪/基因检测仪    浏览 447 次

我拿到上海生工去测序说有重叠峰,打算跑高浓度电泳,但不知道应该如何控制胶的浓度和电泳电压时间。。。。希望有经验的人给个参考。。谢谢

精彩问答
敏姐是个好人0 发布日期:2017-09-05
我跑过700bp的电泳,用1.5%-2%的胶都是可以的。
电压在120-130V之间,大致时间在30-40分钟。根据你们不同电泳仪的设置,可以观察溴酚兰条带来判断时间。一般溴酚兰接近胶的末端时,就可以了。

另外,有重叠峰的原因比较多。DNA测序可以选择让生工给你做纯化,这样好些。以前我自己纯化的DNA也没有测出。如果还是测序失败,说明DNA有问题。(比如说做的是随机突变的PCR,那么是不可能测出来的)
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沙漠之鹄 发布日期:2008-11-18
个人经验,小于1kb的片段我一般用1.2%的胶,可以良好分离。电泳120V,40分钟。我用的电泳槽较大,大约20多厘米。电压也就是4~5V每厘米。你可以试试。
CH68453622 发布日期:2008-11-19
1%~1.5%的琼脂糖都可以
不同的电泳仪设置不一样
一般150V,或者100v/50mA
时间40~50分钟
跑胶分离后要纯化
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