我要发布
仪器网/ 仪器社区/ 液相色谱保护柱/ GX液相出现双峰重叠

GX液相出现双峰重叠

我就是二比汪洋    2010-04-27    液相色谱保护柱    浏览 381 次

对照品是腺嘌呤和枸橼酸,供试品为CPDA1 昨天流动相缓冲液是磷酸缓冲液,用的是磷酸氢二钠4.5g,磷酸二氢钠1.6g,二硫酸四丁基胺0.3g,+900ML注射用水用磷酸调PH到2.5(PH计确认无误),加水至1000ML,和HPLC级甲醇15:85混得流动相。 今天也是同样配了200... 对照品是腺嘌呤和枸橼酸,供试品为CPDA1

昨天流动相缓冲液是磷酸缓冲液,用的是磷酸氢二钠4.5g,磷酸二氢钠1.6g,二硫酸四丁基胺0.3g,+900ML注射用水用磷酸调PH到2.5(PH计确认无误),加水至1000ML,和HPLC级甲醇15:85混得流动相。

今天也是同样配了2000ML。先使用昨天配的流动相稀释和平衡柱子(排除清洗操作和稀释的浓度问题)

昨天使用时出峰很正常但是下峰收尾略拖长,但是今天出现双峰重叠现象,起初伴有平头峰,量程问题已经解决,但腺嘌呤和总枸橼酸依然重叠,枸橼酸对照品提前出峰(时间和腺嘌呤相近),是否是流动相问题,但是若是流动相问题昨天做液相出图很正常,分离的很好,还是缓冲液冰箱里放过夜失灵??

求解~

精彩问答
海上同行 发布日期:2010-04-28
重配流动相吧,柱压下降为什么要反冲柱子?柱压偏高才反冲的。 分析测试百科网乐意为你解答实验中碰到的各种问题,基本问题都能得到解答,有问题可找我,百度上搜下就有。

可能是色谱柱污染了,用的是C18柱的话,用水和乙腈多清洗一下,离子对流动相对色谱柱的损伤都比较明显,尽量缩短检测时间,做完后立即清洗色谱柱。

流动相还是现配现用的好,反冲柱子一般是在柱子有污染的时候或是柱压偏高时再生时常用到。反冲 不是反用

重新配流动相冲一下,你柱子用多长时间了,可能是柱子不行了,换保护柱试一下!反冲对柱子损害太大的

磷酸盐作流动相时做完样一定要用水冲洗干净,磷酸盐要现用现配而且建议用0.2微米的滤膜进行过抽滤

柱压降低,不是盐析出,应该不需要反冲,应该是有残留,用水-乙腈多冲洗下
全部评论
一抹_幽香情 发布日期:2010-04-28
柱子是否安反,或者看看滤头是不是堵了。
最新主题
相关版块
我要评论
X您尚未登录
账号登录
X您尚未登录
手机动态密码登录
X您尚未登录
扫码登录
官方微信

仪器网微信服务号

扫码获取最新信息


仪器网官方订阅号

扫码获取最新信息

在线客服

咨询客服

在线客服
工作日:  9:00-18:00
联系客服 企业专属客服
电话客服:  400-822-6768
工作日:  9:00-18:00
订阅商机

仪采招微信公众号

采购信息一键获取海量商机轻松掌控