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免疫荧光用什么封闭比较好

馋甜    2010-03-25    病毒免疫荧光分析仪    浏览 826 次

免疫荧光中如果要封闭抗原 是用BSA吗 多少浓度 在孵育一抗前 还是之后

精彩问答
zsjxsj 发布日期:2018-06-26
可以使用无蛋白封闭液 PW040 PW041 PW042,
血清封闭:组织切片上有剩余的位点可以与一抗非特异性结合,造成后续结果的假阳性;封闭血清一般是和二抗同一来源的,血清中动物自身的抗体,预先能和组织中有交叉反应的位点发生结合;也可以用小牛血清、BSA、羊血清等,但不能与一抗来源一致。
被采纳
lrhdiaosu 发布日期:2010-03-26
BSA可以用来封闭,网上查到的浓度0.5%到2%都有,1%比较常见。

孵育一抗之前要加,封闭孵育时间过后,加一抗之前不要洗掉,只移除多余液体即可.之后不需要再封闭,但是一抗和二抗都应该用含有BSA的缓冲液来稀释。有些人还加tween来减少非特异性结合。

封闭抗原也可以使用二抗抗体所属动物种类的血清.没有统一固定的浓度要看情况。

用试剂盒则有自带的封闭试剂,效果更稳定有保障。

免疫染色实验一个重要特点就是Z佳条件都是试出来的,每换一个抗体条件都可能需要调整。所以Z好的办法是用生产商测试过的实验方法。写个邮件问一下,就这么简单。
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