免疫印迹与elisa和western blot有什么区别，似乎原理差别不大，谁能细致说说

1.为什么一定要转膜，不能用SDS凝胶直接和抗体结合吗？ 2.为什么用过一次抗体结合后，还要用抗抗体结合一

这是一张免疫印迹与免疫共沉淀的结果图 。。diyi次拿到这种图真心不懂得分析。。求大神帮忙。。考核中请速度

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一抗要针对你的目的蛋白选择特异性很强的相应抗体就可以了的，一般选择抗体说明书上说专门针对WB使用的抗体，而且

其中碳氢被氧化为二氧化碳和水逸出，蛋白质中的氮转化为氨与硫酸结合生成硫酸氯在硫酸中，然后加碱蒸馏，使氨逸出，

Western免疫印迹 （Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋

不贵吧，这个在分子生物学实验室属于常规实验，我们几乎每天都做，平均下来很便宜。做多了，熟练了，就会做得更好。

答：拿这张片子对应的膜来对比，不过这张膜上要有预染marker，通过marker上的条带的分子量大小进行估计

在膜上面除了目的蛋白的以外的地方，还有很多空白，这些空白也会和抗体发生非特异结合，所以要用封闭液蛋白来填充这