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急!!关于血球计数板和细菌计数的问题

gjvgjmnvv    2013-05-16    细胞计数器    浏览 1929 次

1.血球计数板和细菌计数板的差别是什么分别是什么样子的?细菌计数板的百科上特别具体地介绍了血球计数板的样子但是细菌计数板连张图都没有但是又说“细菌计数板较薄,可以使用油镜观... 1. 血球计数板和细菌计数板的差别是什么 分别是什么样子的?细菌计数板的百科上特别具体地介绍了血球计数板的样子 但是细菌计数板连张图都没有 但是又说 “细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。而血球计数板较厚,不能使用油镜” 但是我用的是油镜 又觉得使用血球计数板的 就是像图上那个
2.http://wenku.baidu.com/view/b24d80040740be1e650e9a56.html这个文库的资料里说 “或细胞数<200个/10mm2或>500个/10 mm2 时,说明稀释不当,需重新制备细胞悬液。”是什么意思?我用的是数五大格总数来计数的 想知道根据上面这段话 5格加、起、来(就是5格总数)需要大于、小于多少个菌数?
3. 可以的话介绍一下细胞计数的方法都有哪些 只列名字也没关系 尽量多点

我知道问题有点繁琐 大家帮帮忙 谢谢!

精彩问答
荷叶下的鱼的家 发布日期:2017-12-16
血球计数法是不能使用油镜的。因为血球 计数法要使用盖玻片,盖上盖玻片可以确保计数室的高度是0.1mm(这个在你的血球计数板的左上角有标注)。在计数时,还要确保把计数室处于液体不同深度的微生物全部计入。不论是盖玻片厚度还是计数室的高度,都超过了油镜的工作距离(一般也就是在0.1mm左右)。
所以,用血球计数法,应使用高倍镜观察。对于较大的细胞,如血细胞(名字来由)、酵母细胞,计数没有问题。对于一般的细菌而言,由于个体太小,在高倍镜下看不清,不适合用该方法。
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gufan215 发布日期:2013-05-28
细菌计数板的使用

准备
准备计数时,磨光的表面小心地用擦镜纸擦干净。盖玻片也要擦干净。

盖上盖玻片

在需要盖的周边区域需要用蒸馏水弄的微湿然后盖玻片要慢慢的从计数板的前端推入,直到盖玻片的前端边缘与计数板的划格子的区域处于同位。

注意:盖玻片是很容易坏掉的!

在外部支持和盖玻片之间的干扰线(牛顿环)的组成显示了盖玻片的准确位置。

计数板加样

取一个良好混合型的吸管并且放置一些初期的几滴液体。
把吸管的外部擦干然后保持吸管一定的角度直到小滴液体被吸管吸上去。然后这滴液体被放置在盖玻片和计数板之间。由于盖玻片和计数板之间的毛细管现象作用的结果,两个平面之间的缝隙被灌满。在溶液要满出击数板截面的边缘之前,马上移走吸管的。如果有可见气泡或者液体已经满出边缘并且进入其他的沟里,那么计数板就要擦干净并且重新加样。

计数
装载好的计数板被放置在显微镜台上然后计数格在低倍镜焦距中显示。高倍物镜要非常小心的操作,因为计数板比常规的要更厚。如果你不小心的话,会导致计数板或者物镜镜头的损伤。

如果可能的话,在作血细胞计数的时候使用机械平台的显微镜。显微镜的照明是重要的,太亮了会影响划格线的观察。光可以通过虹膜光圈减弱直到划得格子在背景中再次清晰可见。细胞/质粒的计数应该充分稀释到他们不再互相重叠,并且均匀的分配。

要完成计数检测需要扩大到期望的可见的细胞/质粒。细胞数量的计算推荐计数100方格作为排除少量的结果。

计数格在超过划线区域使用时需要均匀的分配,并且这个通过藉由三倍之数决定的方格支架在进入区段之内。

计数完100方格后总数除100(计数的方格数),来得到每格的平均值。乘稀释度,除1/4000(每个小方格的立方容积1/20 x 1/20 x 1/10 – 1/4000mm3)。这次计算得到的数字是原非稀释流质的每立方毫米的细胞数量。
豆豆乐的故事 发布日期:2013-05-27
1.数红细胞用专用板,就是你图片上的版,不能用油镜,油镜是看细菌用的,看细菌用一张载玻片就行了,但是要烤干染色
2.细胞数<200个/10mm2或>500个/10 mm2 时,属于异常临床结果了吧。不知道你要计数的是红细胞还是白细胞, 数的格子不一样的。白细胞数4角大方格,红细胞数ZY大方格的25个中方格,每个中方格又有16个小方格。
3.还是自己百度的,我也不知道你想问什么
lxm690724 发布日期:2013-05-17
我这两天正用这个东西做菌的计数,画菌的生长曲线,我的理解就是怎么用这个能计出数来就行是吧?
细菌计数板,我前两天听一教微生物的老师说过,国外有这个东西,但国内暂未见到。我用的就是上图的这个。
你用10倍镜观察,就会发现25个中格,每个中格里有16个小格和16个中格,每个中格里有25个小格的意思了。菌计数的时候,16个中格,只要查四个角上的中格里菌数,然后按公式计算就行了。如果是25个中格,那就四个角的中格加上正中间的中格中菌数,然后按公式计算就行了。
只要理解了25*16和16*25,公式自然就明白了,就自然会用了。
爱终如一 发布日期:2013-05-17
1、这两种计数板的样子差不多,你的照片是血球计数板,主要是盖玻片下面的液体厚度为0.1mm,比较厚,不适用于细菌计数,细菌比血球小得多,细菌在这么厚的液体中会有几层,上层的能看到,下层的就看不到了;好像细菌计数板是0.02mm,反正比0.1薄。
2、你的血球计数板上没小格的面积是1/400平方毫米,10平方毫米就是4000个小格。不要用这种板子计数细菌了,不准。
3、稀释平板涂布法:菌液稀释后涂布平板,培养,数菌落数。定量PCR:提取DNA,定量。
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