贝类dna提取方法

26004531 2009-04-18 核酸提取仪浏览 299 次

菲律宾蛤仔，瓣鳃纲软体动物，用于做微卫星，我知道Z好用SDS法，但网上的资料好多都是收费的啊，学校图书馆也很没用啊，没有具体步骤的话，如果哪位亲能告诉我查那本书也行啊，谢拉

精彩问答

CH68453622 发布日期：2009-04-19

1.1 样品
菲律宾蛤仔样品购自福州仓山程埔头市场，将亲贝解剖后，分别取其性腺、斧足和内脏团各200mg用于DNA提取。
1.2 DNA提取
将组织剪成碎块，置于液氮中冻结后，用预冷的研钵将组织研碎，用1.2ml消化缓冲液(100mmol／L NaC1，10mmol/L Tris-C1，25mmol／L EDTA，5g／L SDS，0.1g／L蛋白酶K)悬浮，置于50℃下温育15h，直至组织块完全破裂，裂解液变清。
用等体积酚\氯仿\异戊醇抽提上述样品，8000r/min离心10min，将上清液转至新管中，加入1/2体积7.5mol／L乙酸铵和2倍体积100％乙醇，12000r／min离心2min；用70％乙醇洗涤2次，用真空干燥器干燥，沉淀用TE缓冲液(pH8.0)重新溶解，成为DNA母液，用于后续DNA的纯度和含量测定以及RAPD模板。

参考资料：《菲律宾蛤仔基因组DNA的提取及其RAPD分析》骆轩江树勋... 生物技术通讯-2003年5期

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走巴走巴发布日期：2009-04-19

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