进行PCR扩增时为什么要将目的基因连到载体上？直接对其进行扩增不行吗？

_丶Kinky 2009-07-23 基因扩增仪浏览 472 次

如题！~~如果比加载体可以不用加引物，直接用水补充不可以吗？

精彩问答

a340244226 发布日期：2009-07-24

连到载体后扩增有好处：载体相对于基因组或cDNA复杂度降低，扩增出的片段纯度比较高，而且循环数可以很低，如20-25循环

切忌用载体扩增时用高循环，否则会有大量smear

引物肯定需要加的！mg2+倒可以不加——我试过！

如果没有后续实验不建议连上载体，因为太费时费事

有问题再联系即可。

全部评论

zpzp78 发布日期：2009-07-24

其实都可以，只不过直接扩增仅仅是目的基因，扩增后还是要连接到载体上，我认为连接到载体上后再扩增，只是为了方便吧.

jiaxiaoxia1986 发布日期：2009-07-24

不连接到载体上你怎么扩增，养分呢

原驼sparrowa 发布日期：2009-07-24

PCR扩增的是重组基因如果不将目的基因载入直接扩增那不只是单纯的复制原来的基因了么

引物就是key 只有有了这个才能将目的基因载入为什么会想到是水呢

好好先生Tel 发布日期：2009-07-24

你的问题有点难以理解。

PCR怎么做要看你的目的啊，如果从基因组中扩基因，连个鸟载体，当然是直接扩增。如果你要获得全长序列，当然要载体，否则首尾的序列不可知。

至于“不加载体可以不加引物”就不知道你在说什么了。

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