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杂交瘤细胞状态不佳对扩增可变区基因有没有影响

天天向上在一起    2017-08-24    基因扩增仪    浏览 479 次

精彩问答
幻雪夜57 发布日期:2017-08-25
如何从杂交瘤细胞中获取抗体基因原因比较多,首先你要确定你师兄是不是从该杂交瘤获得的抗体,获得的抗体量多不多?然后,如果确实是这株杂交瘤,那么你要从两方面着手:一,富集一下上清里面的抗体或者考虑下抗原的包被量,有可能是上清里的抗体量少(上清检测你稀释过没?);二,再对该杂交瘤细胞亚克隆一次,可能是该细胞株不纯或者染色体丢失,产抗体的细胞株丢失但是在过去10年里,基因工程重组技术带来了组合库和抗体工程等技术,尤其在高端抗体应用领域,包括ZL性抗体药物的开发等.重组技术例如噬菌体展示等技术需要更高的技巧,假如你的实验对象是一些高毒性和无免疫性抗原,例如一些肿瘤和病毒自身的抗原,抗体重组技术可以帮你解决这些.据LouisWeiner(FoxChase癌症ZX研究员)称,“多年来科学家们致力于通过围绕改变物种和设计新型的杂交瘤技术来解决问题,但对于一些保守的抗原来说,仍然没有能按照预期的效果来制备它们的单克隆抗体.”如果你的实验需要利用到抗体,无论是否将重组技术带进实验室或者利用它们来制备抗体,下面这些专家提供的需要考虑的地方值得大家留意一下.杂交瘤技术杂交瘤技术起源于1975年,由K?hler和Milstein发明,是许多科学家们热衷的一门技术,它的操作流程明了,许多研究机构也建立杂交瘤核心的实验室来一次性处理多组样品.ThomasJefferson大学的Manser实验室就是使用的重组抗体杂交瘤技术.“我们以前大部分工作都是基于结构基础上的,现在我们有一部分人在做一些定向和随机的基因突变.但是我们的工作变得更以细胞为基础,因此我们将重组技术放弃了.”选择正确的技术取决于你所需的抗体的用途.假如你需要的高产量的抗体,杂交瘤技术是正确的选择.但是它的问题在于长时间的制备过程和不完全的抗原表位的识别.
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