电子显微镜下观察不需经超薄切片的样品时，通常用哪些染色方法

国外某生物YL单位已有显微镜，希望看FITC  PI荧光染色切片

流式细胞术检测细胞凋亡(FITC-PI)

实验方法：

1．用6孔板培养细胞，待细胞生长达到60%-70%，吸出旧培养基，根据实验需求处理，继续培养。

2．根据实验处理时间，把细胞培养液吸出至一合适离心管内，PBS洗涤贴壁细胞一次，加入适量胰酶细胞消化液消化细胞。室温孵育至轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，吸除胰酶细胞消化液。需避免胰酶的过度消化。（注意：悬浮细胞不需要胰酶消化，直接收集到离心管即可）

3．加入步骤(2)中收集的细胞培养液，稍混匀，转移到离心管内，1000g离心5min，弃上清，收集细胞，用PBS轻轻重悬细胞并计数。（注意：加入步骤2）中的细胞培养液一方面可以收集已经悬浮的发生凋亡或坏死的细胞，另一方面细胞培养液中的血清可以有效YZ或中和残留的胰酶；残留的胰酶会消化并降解后续加入的Annexin V-FITC导致染色失败。

解决方案：

明美外贸同事和客户沟通后推荐了明美荧光模块MF-B-LED,当时觉得长通的模块还是能看到PI,和技术等沟通评估后换成窄带，成功解决了这个问题；明美荧光模块可配蓝色、绿色、宝蓝、紫外等激发光组；可应用于呼吸道疾病、生殖道疾病、结核杆菌、自身免疫性疾病等领域荧光的检测。通过推拉滑块即可在明场或荧光的观察方式之间进行切换；不仅可以匹配明美显微镜使用，也可以匹配其他厂家显微镜，例如：奥林巴斯显微镜，尼康显微镜（以上显微镜，均采用无限远光学系统 ）；方便显微镜升级改造。良好的表现，贴切的价格，会让你惊叹！

（来源：http://www.mshot.com/kehuanli/20191203.html广州市明美光电技术有限公司）