VTM病毒保存液能做核酸检测吗？

我们很多都知道VTM病毒保存液是病毒检测中用到的，那么它是用于病毒的核酸检测还是用于无症状患者或接种了疫苗的人的抗体检测呢，不用VTM能不能进行检测呢？可能有些人就不太清楚了。

病毒保存液主要是病毒采样管中添加的成分，并不是每个样品采集处都能进行PCR 检测，因此需要对采集到的病毒拭子样品进行运输。样本送到检测机构后，通过PCR扩增等方法来进行分析，属于病毒的核酸检测。

进行病毒样本采集用的采样管由采样管、采样拭子（鼻、咽拭子）以及管内添加的病毒保存液组成。而保存液又分为灭活型和非灭活型两种：

灭活型保存液：成分有高浓度的裂解盐，不仅能够快速的破坏病毒宿主细胞的细胞膜，还能够变性蛋白质，使病毒的蛋白质变性沉淀，从而让核酸摆脱蛋白质缠绕，释放出核酸；同时还含有缓冲液EDTA和Tris与核酸酶抑zhi剂。

非灭活保存液：成分有Hanks溶液，主要由多种无机盐、缓冲剂、葡萄糖、0.4%酚红在灭菌条件下制成，与细胞生长状态的pH值、渗透压及无菌条件一致，使病毒宿主细胞体外存活时间延长；另外还含有蛋白保护剂保护病毒稳定性，以及缓冲剂与冷冻保护剂。

病毒保存液及采样管的使用：

采样前,在标签上注明样品信息；

根据不同的实验目的，用采样拭子在相应的部位采样;

具体采样方法有以下几种:

a)鼻腔采集：将拭子头轻轻插入鼻腔内采样,用另一拭子以同样方式采集另一鼻腔样本将拭子头浸入采样液中,折断尾部;

b)咽部采集：用拭子采集咽喉部样本,同样将拭子头侵入采样液中,折断尾部。

我们很多都知道VTM病毒保存液是病毒检测中用到的，那么它是用于病毒的核酸检测还是用于无症状患者或接种了疫苗的人的抗体检测呢，不用VTM能不能进行检测呢？可能有些人就不太清楚了。

病毒保存液主要是病毒采样管中添加的成分，并不是每个样品采集处都能进行PCR 检测，因此需要对采集到的病毒拭子样品进行运输。样本送到检测机构后，通过PCR扩增等方法来进行分析，属于病毒的核酸检测。

进行病毒样本采集用的采样管由采样管、采样拭子（鼻、咽拭子）以及管内添加的病毒保存液组成。而保存液又分为灭活型和非灭活型两种：

灭活型保存液：成分有高浓度的裂解盐，不仅能够快速的破坏病毒宿主细胞的细胞膜，还能够变性蛋白质，使病毒的蛋白质变性沉淀，从而让核酸摆脱蛋白质缠绕，释放出核酸；同时还含有缓冲液EDTA和Tris与核酸酶抑zhi剂。

非灭活保存液：成分有Hanks溶液，主要由多种无机盐、缓冲剂、葡萄糖、0.4%酚红在灭菌条件下制成，与细胞生长状态的pH值、渗透压及无菌条件一致，使病毒宿主细胞体外存活时间延长；另外还含有蛋白保护剂保护病毒稳定性，以及缓冲剂与冷冻保护剂。

病毒保存液及采样管的使用：

采样前,在标签上注明样品信息;

根据不同的实验目的,用采样拭子在相应的部位采样;

具体采样方法有以下几种:

a)鼻腔采集:将拭子头轻轻插入鼻腔内采样,用另一拭子以同样方式采集另一鼻腔样本将拭子头浸入采样液中,折断尾部;

b)咽部采集:用拭子采集咽喉部样本,同样将拭子头侵入采样液中,折断尾部。

什么是核酸检测？

核酸检测是指通过特殊的技术手段检测临床样本中是否存在特定的病原体核酸，从而诊断患者的感染原因。新型肺炎核酸检测主要是看它的核酸，通过实时聚合酶链反应，即RT-PCR方法来检测。检测的样本鼻拭子或咽拭子从鼻腔或者口腔用棉签沾取样本再出来做一个检测，这是目前简单、快捷的一个方法。

核酸检测中病毒灭活样本保存液的优势是什么呢？

1.降低RNA降解造成假阴性

核酸样本保存条件苛刻，RNA极易裂解，4℃仅可存放24h，运输过程过长RNA就会出现提前被降解的现象，从而导致检测假阴性增多。病毒样本保存液是采样管内一种病毒样本保护性运输介质，防止病毒采样后不能及时检测在送检过程中病毒降解，避免因病毒在检测途中提前降解造成假阴性。

2.减小核酸提取过程的感染

所有人都知道新冠肺炎的传染性高，检测过程中稍有不慎会被感染。核酸检测需要有专门的仪器和标准的分子检测实验室，需要PCR认证人员操作，步骤繁琐，全程需要5~8个小时，过程中感染风险大。

病毒灭活样本保存液采用裂解盐可以快速对呼吸道病原体进行灭活、保存，使样品失去感染性。由于是灭活病毒而不用培养病毒，首先需要的就是对病毒进行裂解失活、破坏其膜蛋白释放核酸，大大降低了核酸提取过程中被感染的危险度。

德晟研发生产的病毒样本保存液分为病毒灭活样本保存液和非灭活型，非灭活型病毒样本保存液可以完整保护好病毒的蛋白，可用于细胞培养。针对不同的需求所适用的病毒样本保存液也会有所不同，有需求的可直接来电咨询。

当疫情再一次伺机而动时，要想快速的控制病毒的传播，做核酸检测就成了必经之路，同时也备受各界关注。但影响核酸检测结果的因素是多种多样的，包括样本采集部位、采集方式、储运过程、核酸提取操作等等。其中，样本的稳定性是一个关键环节。如何能使病毒快速失活，又能保护病毒核酸不被降解，维持检测稳定性的病毒样本保存液就成了重中之重。

第yi步：打破外壳，消灭“战斗力”

和其他RNA病毒一样，新冠病毒的结果简单来说，是由蛋白质外壳包裹着单链核酸——RNA构成的。我们可以简单地将病毒的RNA视为发号施令的“大脑”，蛋白质则是执行命令的“四肢”。新冠病毒感染人体并发生繁殖活动，引发病症，这个过程都主要由病毒外部具有生物活性的蛋白结构完成。

灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒；它是一种强有力的蛋白质变性剂，能迅速溶解蛋白质，导致病毒结构破碎。当带有新冠病毒的临床样本与保存液混合，样本中的病毒受裂解液作用，蛋白质外壳被迅速破坏，并且这种破坏是不可复原的。这时候，病毒就失去了作恶的“爪牙”，不再拥有对人的感染能力，从而保障了样本运输、处理过程中接触者的安全。

第二步：抑zhi酶活，押送“身份证”

外壳裂解后，新冠病毒的RNA游离在保存液当中。作为单链大分子，RNA的稳定性不像双链的DNA那样岿然不动，在自然环境中随处存在的RNA酶便是使RNA水解断裂的罪魁祸首。因此，通常认为失去外壳保护的病毒RNA是脆弱、不稳定的，需要低温储存才能保证它的完整性。

第三步：配合提取，确认“真凶”

病毒RNA妥善地储存在病毒样本保存液中，在进行检测前，还需要zui后一个步骤：将保存液中的RNA捕捉、浓缩，作为zui终样本加入实时荧光PCR体系中，上机进行检测。

德晟生产的病毒保存液除了灭活型病毒保存液外，还有非灭活型病毒保存液。它是同时保留病毒的蛋白质外壳和病毒核酸DNA或者是RNA，这样病毒在体外具有蛋白抗原表位和核酸的完整性，当然操作失误时也有一定的感染性风险。采样后长时间保存需要保持严格低温。不管是哪种病毒保存液，我们在使用时都需要按照要求严格操作、存放或运输。

因为疫情反反复复，新冠话题又已经成为了我们日常的话题，所有人都因为疫情变得紧张，近段时间武汉更是实行全民进行核酸检测。提到核酸检测就要说到我们德晟研发生产的病毒保存液了。我们核酸检测可是少不了它，它到底在核酸检测中起到什么作用呢?让我们一起来了解一下把！

病毒保存液，目前主要分为灭活型和非灭活型两种。病毒采样拭子是常用的病毒采样方法与PCR相结合可以用于快速病毒性疾病的检测。但是，并不是每个样品采集处都能进行PCR检测，因此需要对采集到的病毒拭子样品进行运输于是拭子病毒保存液应运而生。

对于不同的检测目的，需要使用不同的病毒保存液，目前广泛使用的这两种保存液各有特点。为了满足不同的检测要求，以及不同的病毒检测实验室条件，采样不同的保存液是很有必要的。

病毒保存液(灭活型)采用裂解盐可以快速对呼吸道病原体进行灭活、保存，使样品失去

感染性。已灭活的样品可配套使用多种病毒DNA/RNA提取试剂盒，M32/M96核酸提取仪酸同时配合呼吸道病原体PCR检测试剂盒实现快速检测，特异性灵敏度均不受影响。

病毒保存液(非灭活)含有Hanks液基础庆大霉素真菌抗生素BSA(V)冷冻保护剂、生物缓冲剂及氨基酸等。多种抗生素联合，具有抗细菌和抗真菌的作用;牛血清白蛋白(BSA)作为蛋白质稳定剂，可在病毒的蛋白质外壳形成一种保护膜，使其不易分解，保证病毒的完整性;Hanks缓冲液构建的中性环境，有助于增加病毒的生存时间和感染稳定性。非灭活的病毒保存液通常用于临床流感、禽流感(如H7N9)、手足口病、麻疹等病毒标本及支原体、脲原体、衣原体等标本的采集及运送。

德晟科技自疫情复工以来一直致力于病毒保存液、卡波姆等产品的研发生产，已取得突破性的胜利，客户用后的肯定对我们更是极大的鼓励!我们将一直坚持不懈的做好我们的产品不为眼前的利益，只为更好的发展以及客户的信任。病毒保存液对疫情的作用可真是功不可没呢！

检测新冠病-毒一般有两种方式，核酸检测和抗体检测。但是我们一般都是说做核酸检测，自然就忽视了抗体检测。这是因为抗体检测一般用作新冠核酸检测阴性疑似病例的补充检测指标或疑似病例诊断中与核酸检测协同使用，不能作为确诊和排除依据，更适合回顾式检查。那在这两种新冠检测有何区别？病-毒保存液更适合用于哪种检测呢？

病-毒保存液

它是一种用于病-毒样本检测的液体。主要有灭活型和非灭活型两种。灭活型能迅速灭活病-毒，释放病-毒核酸，用于快速病-毒核酸检测；而非灭活型可同时保护病-毒RNA和蛋白活性，即可用于病-毒核酸检测，又可用于抗体检测。

核酸检测与抗体检测区别：

样本不同

核酸检测需要呼吸道样本，包括咽部、鼻咽部分泌物、痰液、支气管、灌洗液、肺组织活检等，采集过程十分复杂。

抗体检测是验血检测，可以通过末梢采血或者静脉采血，样本采集方式更为便捷和安全，而且样本可以存放72小时。

检测方法不同

核酸检测是对病-毒的直接检测。它是以病-毒特有的DNA序列为检测靶标，通过PCR扩增，使我们选择的这段靶标DNA序列指数级增加，每一个扩增出来的DNA序列，都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号。扩增出来的靶DNA越多，累积的荧光信号就越强。而没有病-毒的样本中，由于没有靶DNA扩增，因此就检测不到荧光信号增强。 而且该核酸样本保存条件苛刻，RNA极易裂解，4℃仅可存放24小时。

抗体检测是间接检测。它不是针对病-毒本身，而是人体沾染病-毒后免疫应答产生的特异性抗体。人体沾染病-毒后一周左右逐步产生抗体并随后快速升高，人体内一般先产生称为IgM的抗体，IgM抗体阳性表示近期沾染，IgG抗体阳性则表示沾染时间较长或既往沾染。

检测条件不同

核酸检测需要有专门的仪器和标准的分子检测实验室，需要PCR认证人员操作，步骤繁琐，全程需要5~8个小时，过程中沾染风险大。

抗体检测抗体检测突破现有核酸检测方法对人员/场所的限制，可以快速、大量检测，且可以在基层实验室完成，且沾染风险小。

由此可以看出，不管哪种新冠病-毒的检测方式都是有利有弊的。抗体检测是对核酸检测“假阴性”的补充，两者结合可有效提高新冠诊断效能，对于疫情防控具有非凡的价值。

       2019年12月底武汉发现新型冠状病毒肺炎以来，感染确诊病例和疑似病例数量仍在不断上升，疑似病例的快速确诊迫在眉睫。目前临床上确诊新型冠状病毒肺炎病例，Z通用的方式仍然是在临床观察的基础上，采集痰液、咽拭子等呼吸道标本进行病毒核酸基因检测，并作出病原学诊断。目前核酸检测的准确性问题牵动了很多人的心，除去该病毒的一些特有特征外，检测过程中的每一个环节涉及的科学仪器和操作步骤都可能对结果产生影响。

       目前新冠状病毒核酸检测主要通过PCR检测的方法，其对试验场地、检验仪器及操作人员的要求都非常高，轻微的污染就可能对结果造成偏差。另外，对检测样本保存条件和设备也有很严苛的要求。并且，由于新冠状病毒的传染危险性，防护准备和后续的消毒处理对整个检测实验来说也异常重要。Cole-Parmer作为一家专业的科研仪器、设备、耗材供应商，可以为新冠状病毒核酸检测提供从防护，采样，样本保存，检测，消毒处理等各环节支持。相信jing准可靠的仪器设备及防护消毒产品一定能为这场战役中的检测工作添砖加瓦。Cole-Parmer与你们一起并肩作战！

Cole-Parmer相关仪器配置单*手套还有病毒防护丁 腈系列可选

       以下是新冠病毒核算检测实验的具体标准介绍，可供各位老师参考，其中涉及的仪器设备和耗材，疫情期间欢迎在微信平台直接联系我们，或者直接联系您当地的销售或经销商。

新冠病毒核酸检测实验

diyi步：样本采集

       通常是在采集地——定点发热门诊进行样本选取。样本一般为鼻咽或口咽拭子、气管吸出物、痰液等。鼻咽拭子居多（其阳性率非常高）

       在采集过程中，Cole-Parmer可为您提供防护服，护目镜，鞋套，以及手套等防护用品。

第二步、样本的包装、保存与运输

       通常采样管需经过3层包装，即：自封袋+运输罐+专用运输箱。在2-4℃进行保存，（通常保存不能超过72小时），再通过UN2814感染性物质专用运输箱，由经过生物安全培训的专人，全身着防护用品运送转运箱。

第三步、样本的核酸检测

• 实验地点：基因扩增实验室

• 实验条件：二级生物安全实验室（P2负压实验室）

• 防护准备：检测人员需进行三级防护的穿戴。按序依次穿戴好一次性帽子、医用N95口罩、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、护目镜和双层乳胶手套。如有条件可加穿一次性隔离衣。                       

• 检测步骤：准备工作，核酸提取（手动），基因扩增与检测，结果分析     

1.准备工作

       实验仪器设备：二级生物安全柜，水浴或烘箱，移液器

       首先检查运输罐是否严格密闭，然后取出罐内的密封袋进行56℃下30分钟的消毒灭活，灭活后可从密封袋内取出采样管对采集的样品进行分装、混匀。

       整个过程应在二级生物安全柜内进行，灭活设备应尽量选择可放置于生物安全柜内的小型设备以减少样品进出安全柜内的次数。

2.核酸提取（手动）

       实验仪器设备：二级生物安全柜，移液器，振荡器，金属加热器，微型离心机

       首先需要依据不同品牌试剂盒的要求进行裂解液的配置。然后，采用化学试剂法对核酸样本进行裂解，样品裂解前需经过充分的振荡混匀，如有必要可采用金属加热器于56℃下充分裂解病毒所释放出的核酸。通过多次离心完成裂解产物的过滤收集。Z后利用离心纯化法对裂解后的核酸进行洗涤与回收。

3.基因扩增与检测

       实验仪器设备：生物安全柜，PCR板离心机，实时荧光定量PCR仪

       首先，需根据不同品牌试剂盒的要求将试剂盒内的不同组分（引物，dNTP，聚合酶等）按各自所需的体积量进行配置，并充分离心混匀。然后将核酸样本依次加入至每个PCR反应管中，加盖密闭后进行充分的混匀、离心。Z后，将PCR反应管置于实时荧光定量PCR仪中，按照试剂盒说明书的要求进行扩增参数的设置后即开始检测。

4.结果分析

       Z后，通过计算出的CT值，依据检测试剂盒厂家说明书的判断标准进行判定，阳性、阴性或者不确定。

第四步、未测样品的保存

       如样本未能及时检测，需将样本于-70℃或以下进行保存。Cole-parmer专为您提供保存样品的Cole-parmer超低温冰箱。

第五步、消毒处理

       生物安全柜内：对台面、仪器、外层手套进行消毒，相关垃圾投入专用YL垃圾桶中。并开启紫外灯照射生物安全柜，时长应不低于30分钟。

       核酸检测实验室内：对实验室台面、地面进行消毒，并开启紫外照射灯进行空间消毒，时长应不低于30分钟。

       实验人员：按自上而下、由内而外的顺序依次摘脱三级防护穿戴，并置于专用YL垃圾桶内。

       YL垃圾：所有与新型冠状病毒相关的YL垃圾需经过湿热高压灭菌（121℃，30分钟）后再作为普通的YL垃圾处理，且垃圾袋上应标注新型冠状病毒YL垃圾的相关信息。

        注意：实验试剂、设备等需取得YL器械注册证，科学研究除外。

CopanUTM®:用于收集、运输和保存病毒分子诊断测试的临床标本的通用运输介质

UTM®是一种FDA批准的收集和运输系统，适用于收集、运输、保存和长期冷冻保存含有病毒分子诊断检测的临床标本，包括COVID-19、衣原体、支原体或脲原体有机体。

运输介质装在一个塑料螺旋盖管中，在室温或冷藏温度下可维持生物活力48小时。

·室温，可靠

室温稳定的系统保持生物的生存能力长达48小时，不需要冷藏前收集

UTM®已经过测试和验证，完全符合CLSI M40-A2:微生物运输系统质量控制标准

*独特的培养基配方包括抗生素，以制细菌和真菌的生长，而不影响病毒，衣原体，支原体或脲原体

酚红pH指示剂提供了在整个存储和产品寿命中介质完整性的目视测量

方便的系统与多种配置

·可在单个运输管散装或作为患者收集包与棉签配对。取样棒轴上的模制断点，安全可靠地将取样棒断裂到运输管中

·裙边，平底管与独特的内部锥形形状，使样品容易离心，并允许管直立在实验室工作台。